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第八章 RNA的生物合成 (转录);本章内容;转录 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;复制和转录的区别 ;参与转录的物质;第一节 模板和酶;能够转录RNA的那条DNA链称为模板链，也称作有意义链。 与模板链互补的另一条DNA链称为编码链，也称为反义链。 ;;5′···GCAGTACATGTC ···3′;转录的连续性：RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶的催化下，连续合成一段RNA链，各条RNA链之间无需再进行连接。 转录的单向性：RNA转录合成时，只能向一个方向进行聚合，所依赖的模板DNA链的方向为3→5，而RNA链的合成方向为5→3。 ;二、参与转录合成的酶和蛋白因子;RNA聚合酶（DDRP） 这是一种不同于引物酶的依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。 该酶在单链DNA模板以及四种核糖核苷酸存在的条件下，不需要引物，即可从5→3聚合RNA。 ;原核生物中的RNA聚合酶全酶由五个亚基构成，即?2???。 ?亚基与转录起始点的识别有关，在转录合成开始后被释放；余下的部分（?2??）被称为核心酶，与RNA链的聚合有关。 ;真核细胞的RNA聚合酶有三种：分别是RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ和RNA聚合酶Ⅲ。 RNA聚合酶Ⅰ、RNA聚合酶Ⅱ分别负责合成rRNA和mRNA， RNA聚合酶Ⅲ则催化转录生成5srRNA和tRNA。;第二节 转录过程;一．起始阶段 首先由RNA聚合酶的σ因子辨认DNA的启动子部位，并带动RNA聚合酶的全酶与启动子结合，形成复合物，同时使DNA分子的局部构象改变，结构松驰，解开一段RNA双链（约10几个碱基对），暴露出DNA模板链。在DNA模板链转录起点碱基的引导下，第一个核糖核苷酸进入相应的位置，配对结合。转录起点的碱基多为T或C，因此第一个结合的NTP多为ATP或GTP。;二．延长阶段 RNA链的延长是由核心酶催化的。当第一个核糖核苷酸结合后，σ因子便从全酶中脱落下来。并与另一个核心酶结合成RNA聚合酶全酶，起始另一次转录。脱落的σ因子可以反复使用。失去σ因子的核心酶发生构象改变，与DNA模板的结合变得较为松驰，可以沿DNA模板链的下游方向（即3′→5′的方向）滑动。在核心酶的催化下，4种核糖核苷酸（NTP）按照模板链碱基排列顺序的指引依次进入，按照U-A,A-T,C-G的碱基配对原则逐个地加到前一个核糖核苷酸的3′-OH上，并形成磷酸二酯键。随着核心酶不断沿模板链方向滑动，DNA双螺旋逐渐解开暴露模板链，RNA链沿5′→3′方向逐渐延长。此时，已合成的RNA链从5′-端逐渐与模板链分离，而模板链与编码链重新结合形成双螺旋(图)。;三．终止阶段 当核心酶滑行到DNA模板链的终止部位即停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来，就是转录终止。原核生物转录终止有两种类型：一种是依赖ρ因子终止的转录，ρ因子能与转录产物RNA结合，使RNA聚合酶停顿。ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶活性，它能利用ATP水解释放的能量，使RNA链从模板DNA链上拆开，并从转录复合物中释放出来。另一种是不依赖ρ因子终止的转录。在DNA模板链上靠近终止处有些特殊碱基序列，即较丰富的A-T配对区或G-C配对区，是转录终止信号。当核心酶遇到终止信号后，RNA转录产物就形成特殊的发夹样结构，阻止核心酶的滑动，RNA链的延长便终止。 转录终止后，核心酶也从DNA模板链上脱落下来，与ρ因子重新结合为全酶进行下一次的转录。这样合成的RNA是初级转录物，即RNA前体。 如前所述，某些抗生素如利福霉素和利福平能抑制细菌RNA聚合酶，因而能抑制细菌RNA的合成。;第三节 转录后的加工和修饰 ;一、mRNA的转录后加工 真核生物mRNA转录后，需进行5′-端和 3′-端的修饰以及对hnRNA进行剪接。 （一）．首尾修饰 指在mRNA的5′-端加“帽”，3′-端加“尾”。5′-端加“帽”是在核内进行的，在hnRNA的5′-末端加上一个m7GpppG“帽”结构，其功能与蛋白质生物合成的起始有关。mRNA3′-末端接上一段约30～200个polyA,该结构称为“尾”，其功能是引导mRNA由细胞核向细胞质转移。;（二）．mRNA的剪接 真核细胞的mRNA前体称核内不均一RNA(hnRNA)，它是由断裂基因转录的，包含有内含子和外显子的区段，所以其分子量比成熟的mRNA大几倍，甚至数十倍。剪接就是把hnRNA中的内含子除去，把外显子拚接起来，成为具有翻译功能的模板—mRNA。;二、tRNA的转录后加工 ? 1、切除多余的核苷酸.????2、剪切内含子：核酸内切酶切除内含子,连接酶进行连接。????3、修饰与3末端加-CCA: 修饰包括甲基化,脱氨基,还原反应等，在核苷酸基