医学检验学实验九.ppt

ml g/L的蔗糖溶液 ml枸橼酸钠抗凝血 0.5 4.5 92.4 37℃ 30分钟 混匀 1000 rpm离心5min观察 1、所用器材均应清洁干燥，以免溶血。2、也可用葡萄糖乳糖麦芽糖等替代蔗糖，均能获得满意的结果。3、每次实验需同时做对照。 BACK 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 10.0g/L Nacl （ml） 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 蒸馏水（ml） 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 Nacl浓度（g/L） 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2 5.6 6.0 6.4 6.8 1、按渗透脆性试验表格量加好试剂，共24管，充分混匀 2、每组采集1份静脉血3ml，加入放有肝素的试管中，立即颠倒混匀 3、红细胞渗透脆性试验24支试管中，每管加1滴全血，立即轻轻颠倒混匀，记录时间 4、酸溶血和蔗糖溶血试验准备，对照用标本为每组自采静脉血，试验管用酸溶血试验用专用患者红细胞 *** 红细胞渗透脆性试验 Ham试验(酸溶血试验） 蔗糖溶血试验  1、掌握红细胞渗透脆性试验原理及临床意义。 2、掌握红细胞渗透脆性试验方法、结果观察及结果的报告。 S/V↑，抵抗力↑，渗透脆性↓； 反之，渗透脆性增高。 同时按上述方法做正常对照。 用一次性的滴管垂直滴加于上述试管各1滴（约0.05 ml），轻轻颠倒混匀。 室温静置2 h，低速离心（1000rpm ×5min）观察结果(从高浓度开始): 开始溶血: 完全溶血: 开始溶血： 3.8 g/L ～ 4.6 g/L 完全溶血： 2.8 g/L ～ 3.2 g/L 患者与正常对照,溶血管的NaCl浓度相差0.4g/L具有诊断价值。 1、试剂加样要准确，最好用前新配。2、可用肝素抗凝新鲜静脉血。3、黄疸较深的标本影响结果。 4、每次试验应有正常对照。5、所用器材应洁净、干燥。6、避免体外溶血。 1、红细胞渗透脆性增加：遗传性球形红细胞增多症、椭圆形红细胞增多症；自身免疫性溶血伴有球形红细胞增多；口形红细胞增多症（水肿型）。 2、红细胞渗透脆性降低：地中海贫血、缺铁性贫血、铁粒幼红细胞性贫血、血红蛋白病等；严重肝病、阻塞性黄疸、脾切除术后。 1、掌握酸溶血试验的原理及临床意义 2、掌握掌握酸溶血试验的方法、结果观察及结果报告。 在酸化（PH6.4-6.5）的正常或自身血清中（含有补体）中，经37℃孵育，红细胞易发生溶血。 0.2 mol/L HCL0.154 mol/L NaCl溶液 反应物 试验管 对照管 新鲜混合血清（ml） 1.0 1.0 患者50%红细胞（ml） 0.05 -- 正常人50%红细胞（ml） -- 0.05 0.2mol/L盐酸（ml） 0.05 0.05 混匀，置37℃水浴箱内1h后，1000rpm× 5min离心观察上清液。 * 正规方法需病人和正常人的血清及红细胞，共做4管 操作步骤 试验管溶血、对照管不溶血为阳性；两管均不溶血为阴性。 1、不宜用抗凝血，因抗凝剂中K+，Na+可影响PH。2、血清酸化后，必须塞紧试管，否则CO2逸出，影响血清PH。 3、为保证补体充足，最好采用多人混合新鲜血清。 4、如患者经多次输血，血中异常红细胞相对减少，可造成本试验的假阴性或弱阳性。 利用蔗糖能通过C3前活化素系统激活补体经典途径而使PNH患者的红细胞发生溶血。 ***