临床血液学检验技术19一期止血检查、血管壁与血小板检查.ppt

临床意义： 增高：血栓前状态与血栓性疾病 减低：血小板功能缺陷、血管性血友病，使用抗血小板药物 * 玻球瓶法、玻珠柱法和玻璃滤过器法等，参考范围各不相同，影响因素多，难以标准化，临床应用受限制。 1、光学比浊法（常用） 2、全血电阻抗法 3、剪切诱导法 4、光散射比浊法 5、微量反应板法 6、自发性血小板聚集 * 二、血小板聚集试验 * 原理： 光学比浊法 PRP透光率 PPP透光率 TM 最大透光率 platelet-rich plasma 富含血小板的血浆（PRP） platelet-poor plasma 贫血小板的血浆（PPP） * 增高 血栓前状态和血栓性疾病。 降低 遗传性/获得性血小板功能缺陷 选择不同诱聚剂反映血小板不同功能。 * 临床意义 * 诱聚剂 机理 功能 疾病 二磷酸腺苷（ADP） 肾上腺素 凝血酶 胶原 合适浓度的诱聚剂与相应受体结合促进PLT一相聚集，PLT继而释放活性物质促进二相聚集。 聚集 释放 血小板无力症 储存池缺陷症 花生四烯酸 通过转化为血栓素A2 ，间接促PLT聚集 聚集 血小板无力症 监测抗血小板（阿司匹林）药物与判断疗效 瑞斯托霉素 介导vWF 与PLT结合，促进聚集 粘附 巨血小板综合征 不离心，接近生理状态 手术前血小板聚集功能评价、血小板聚集功能增高监测、抗血小板药物疗效观察 麻烦，检测时间长，不敏感 不同疾病使用不同诱导剂诱导的血小板聚集曲线 * 三、血小板膜糖蛋白（platelet membrane glycoprotein）检测 * 流式细胞术（FCM） 质膜糖蛋白： GPⅠb-Ⅸ、 GPⅡb-Ⅲa等与遗传性疾病有关 颗粒膜糖蛋白： CD62P或CD63等与活化有关的标志物 （一）出血时间（Bleeding time, BT） 是指皮肤毛细血管被刺破后自然出血到自然止血所需的时间能够反映了毛细血管、血小板、血管内皮细胞的功能等。 初期止血的筛查试验 首选方法：出血时间测定器法。 影响因素： 切口方向 切口深度 环境温度 静脉血压 年龄 药物 血细胞比容 出血时间测定器法（TBT） 应用评价：较为敏感试验，影响因素多不作为常规筛查试验。 参考值：6.9±2.1分钟,>9分钟为延长 临床意义(血管与血小板) 1.BT缩短 血栓前状态和血栓性疾病 2.BT延长 BT PLT 临床意义 延长 减少 血小板减少性紫癜（特发\继发） 延长 正常 血管性血友病、遗传\获得性血小板功能异常症、低（无）纤维蛋白原血症 延长 增多 原发性\继发性血小板增多症 正常 正常 遗传性出血性毛细血管扩张症和单纯性紫癜 过敏性紫癜（束臂试验 +） 停用抗血小板药物如阿司匹林 第一节 血管壁和内皮细胞检验 * （内皮细胞,vWF） 血管内皮的止血与抗血栓作用 血管收缩(TXA2、ET) 激活血小板（vWF、PAF） 促凝（TF、胶原、V、Ca++） 抗纤溶(PAI>t-PA) 止血 抗血栓 血管舒张(PGI2、NO) 抵制血小板(PGI2、vWF裂解酶) 抗凝（AT、TM、TFPI、t-PA、u-PA） 止血 抗血栓 * 血管内皮细胞的检验 一、血管性血友病因子 二、血浆内皮素-1 三、血浆血栓调节蛋白 四、血浆6-酮-前列腺素F1a和 去甲基6-酮-前列腺素F1a * 血管内皮损伤的指标 一、血管性血友病因子检测 (von Willebrand factor,vWF) 具有与胶原、血小板膜糖蛋白、瑞斯托霉素、凝血因子Ⅷ等结合的多个功能区。 * 胶原+vWF+GPⅠb/Ⅸ---------血小板粘附 瑞斯托霉素诱导GPⅠb/Ⅸ+vWF+GPⅠb/Ⅸ --------血小板聚集 凝血因子Ⅷ 的载体 GPⅡb/Ⅲa+vWF+GPⅡb/Ⅲa--------血小板聚集 一、血管性血友病因子检测 (von Willebrand factor,vWF) * 1、血浆vWF抗原（vWF ：Ag） 2、血浆vWF活性（vWF ：A） 3、vWF的功能分析 vWF ：RC（血浆vWF瑞斯托霉素辅因子检测） RIPA（瑞斯托霉素诱导的血小板凝聚试验) vWF ：C Bc（ vWF 的胶原结合能力） vWF ：FⅧ BC（ vWF 的FⅧ结合能力） 4、多聚体分析 5、基因诊断 免疫比浊法 1、血浆vWF抗原（vWF ：Ag） vWF含量 2、血浆vWF活性（vWF ：A） vWF上GPⅠb受体含量 抗vWF乳胶颗粒 抗vWF的血小板结合位点（GPⅠb）的乳胶颗粒 1、血浆vWF抗原（vWF ：Ag） 2、血浆vWF活性（vWF ：A） 二者与血型(O型显著减低)有关 血管内皮损伤时，vWF ：Ag升高 急性时相反应时，vW