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异常红细胞检查显微镜检查法作业指导书 1. 实 验 原 理 用 瑞 氏染 色 法 ， 对 制 备 好 的 血 涂 片 进 行 染 色 ， 然 后 在 显 微 镜 下进 行 形 态 检 查 。 2. 标 本 采 集 ： 2.1 标 本 种 类 ： 新 抽 取 的 抗 凝 血 或 手 指 末 梢 血 。 2.2 标 本 要 求 ： 2.2.1 抗 凝 剂 采 用 EDTA K2 抗 凝 。 2.2.2 用 手 指 末 梢 血 作 检 验 时 ，如 手 指 有 冻 疮 ，则 主 张 采 用 耳 垂 血 。 3. 标 本 储 存 ： 取 材 后 应 立 即 推 制 成 血 涂 片 ，并 尽 快 送 检 。 4. 标 本 运 输 ： 保 持 干 燥 ， 室 温 运 输 。 5. 标 本 拒 收 标 准 ：污 染 ， 凝 固 标 本 不 能 作 测 定 。 6. 实 验 材 料 ：瑞 氏血 细 胞 染 色 液 ，生 产 厂 家 ：（台 资 ） 珠 海 贝 索 生 物 技 术 有 限 公 司 。 7. 实 验 仪 器 ： 7.1 仪 器 名 称 ： OLYMPUS显 微 镜 7.2 仪 器 厂 家 ： OLYMPUS 7.3 仪 器 型 号 ： OLYMPUS CH30 8. 操 作 步 骤 8.1 采 血 后 推 制 厚 薄 适 宜 的 的 血 膜 片 ，血 膜 应 呈 舌 状 ，头 、 体 、 尾 清 晰 可 分 。 8.2 瑞 氏染 色 ：将 制 好 的干 燥 血 涂 片 平 置 于 染 色 架 上 ，滴 加 瑞 氏染 色 液 A 液 3-5 滴 使 其 迅 速 盖 满 血 膜 ，然 后 加 瑞 氏 染 色 B 液 3-5 滴 ， 轻 轻 摇 动 玻 片 或 用 洗 耳 球 吹 气 使 A、 B 染 液 充 分 混 匀 ，染 色 1-2 分 钟（ 气 温 低 或 涂 片 较 厚 时 可 适 当 延 长 染 色 时 间 ）， 用 自来 水 冲 去 染 液 ， 待 干 。 8.3 高 倍 镜 （必 要 时 油 镜 ）观 察 红 细 胞 形 态 。 9. 结果判断与分析： 在 良好 的 染 色 血 涂 片 上 ，正常 红 细 胞 的 大 小 形 态 较 为 一 致 ， 直 径 为 6.7 ～ 7.7 μm， 染 色 淡 红 色 ， 中 央 着 色 较 边 缘 淡 。各 种 病 因 作 用 于 红 细 胞 生 理 进 程 的 不 同 阶 段 引 起 相 应 的病 理 变 化 ，导 致 某 些 类 型 贫 血 的 红 细 胞 产 生 特 殊 的 形 态 变 化 ，可 从 染 色 血 涂 片 上 红 细 胞 的 大 小 、形 态 、染 色 等 方 面 反 映 出 来 。此 种 形 态 学 改 变 与 血 红 蛋 白测 定 、红 细 胞 计 数 结 果 相 结 合 可 粗 略 地 推 断 贫 血 原 因 ，对 贫 血 的 诊 断 和 鉴 别 诊 断有 很 重 要 的 临 床 意 义 。红 细 胞 的 形 态 变 化 主 要 表 现 在 以 下 四个 方 面 ： （一 ）红 细 胞 大 小 改 变 1. 小 红 细 胞（ microcyte ）直 径 小 于 6 μm 者 称 为 小 红 细 胞 ， 正 常 人 遇 见 。 如 果 血 涂 片 中 出 现 较 多 染 色 过 浅 的 小 红 细 胞 ， 提 示 血 红 蛋 白合 成 障 碍 ，可 能 由 于 缺 铁 引 起 ；或 者 是 珠 蛋 白 代 谢 异 常 引 起 的 血 红 蛋 白病 。而 遗 传 性 球 形 细 胞 增 多 症 的 小 红 细 胞 ， 其 血 红 蛋 白充 盈 良好 ， 生 理 性 中 心 浅 染 区 消 失 。 2. 大 红 细 胞 （macrocyte ）直 径 大 于 10 μm。 见 于 溶 血 性 贫 血 及 巨幼 细 胞 贫 血 。 3. 巨 红 细 胞（ megalocyte ）直 径 大 于 15 μm。最 常 见 于 缺 乏 12 叶 酸 及 维 生 素 B 所 致 的 巨 幼 细 胞 性 贫 血 。其 胞 体 所 以增 大 是 因 为 缺 乏 上 述 因 子 时 ，幼 稚 红 细 胞 内