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2020-03-28 发布于江苏
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细胞转染步骤.docx

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细胞转染汉恒生物 HANBIO 实验前一天铺板 293T 细胞准备转染；实验当天从细胞培养箱中取出前一天的细胞于显微镜下观察细胞密度，达到 70%~80% 的汇合率即可进行转染 ① 转染前，吸去细胞原有培养基，加入新鲜的完全培养基，轻轻八字混匀后放入培养箱中，待转染以 100mm 培养皿为例， ② 转染时取 2 个 EP 管，各加入 500μ l 无血清培养基，然后一份加入常温溶解好的质粒，另一份加入本公司转染试剂lipofiter TM ③ 加好后轻轻振荡 EP 管，使之混匀，静置室温孵育5min ④ 5min 后，将两个 EP 管中的液体混合，吹匀后静置室温孵育20min ⑤ 20min 后，取出培养箱中的培养皿，加入 EP 管中混好的脂质体， 8 字摇晃后，放入培养箱培养 6h 6h 后，取出培养箱中的培养皿，吸去旧的培养基，加入 10ml 完全培养基后放入培养箱，继续于 37℃培养箱培养 24h ⑦ 24h 后取出培养皿，荧光显微镜观察转染效果