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第三节实验相关试剂和缓冲液的配制
表 2.3 1ml 细胞裂解液的配制方法
组分 浓度
NaCl 150 mM
Tris ( pH 8.0 ) 50 mM
Triton X 10 μl
Aprotinin 5 μl
Leupeptin 5 μl
PMSF 1 mM
表 2.4 SDS凝胶的配制方法
分离胶 (8ml) 浓缩胶 (4ml)
Acrylamide concentration 10% 12% 4%
30% Acrylamide mix 2.67 ml 3.2 ml 0.54 ml
1.5 M Tris pH 8.8 2ml 2 ml —
1 M Tris pH 6.8 — — 0.5 ml
H O 2.72 ml 2.64 ml 1.2 ml
2
10% SDS 80 μl 80 μl 40 μl
10% Ammonium Persulfate 80 μl 80 μl 40 μl
TEMED 6 μl 8 μl 3 μl
表 2.5 SDS电泳缓冲液配制方法
组分 浓度
Tris base 0.025 M
Glycine 0.25 M
SDS 0.1% (W/V)
表 2.6 转膜缓冲液的配制方法
组分 浓度
Tris base 25 mM
Glycine 0.2 M
Methanol 20%
表 2.7 TBST 漂洗液的配制方法
组分 浓度
NaCl 150 mM
Tris-HCl
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