第五章植物离体快速繁殖.ppt

第五章 植物离体微繁;植物有哪些繁殖方法？;分株繁殖;扦插繁殖;1.植物离体微繁;植物离体微繁的特点; 1.1 植物离体微繁过程;第一阶段：稳定无菌培养体系的建立时期;外植体的选择;外植体的灭菌;外植体的接种和培养;接种材料修整与冲洗;材料表面灭菌;;① 顶梢切割成0.5－1.0cm的茎尖； （除叶,剥去休眠芽的鳞片)； ② 茎尖流水冲洗2－4h； ③ 75%酒精迅速漂洗30s； ④ 0.1%升汞或稀释20倍的次氯酸钠液消毒5－8min(取自老枝条上的可适当延长时间)； ⑤ 无菌水冲洗3-5次。 　　　　　　　　　　;; 注意; 从植物组织培养积累的知识中，可将植物再生过程划分为四种方式： 1) 顶芽和腋芽的发育 2) 不定芽的发育 3) 体细胞胚状体的发生与发育 4) 原球茎的发育 ; 1) 顶芽和腋芽的发育;; 茎尖培养;根据培养目的和取材大小分为： 微茎尖培养 普通茎尖培养 ;普通茎尖指几毫米到几十毫米的芽尖及侧芽;微茎尖为0.3-0.5mm;普通茎尖培养方法;①直接取材： 在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药），取顶芽或侧芽。 ②从试管苗获取。　　　　　　　　　; 茎尖培养时需要注意的问题; 茎段培养过程; 图示茎段培养过程;2) 不定芽的发育; 3) 体细胞胚状体的发生与发育; 体细胞胚状体的发生方式;4）原球茎的发育; 初代培养旨在获得无菌材料和无性繁殖系。即接种某种外植体后， 最初的几代培养。 初代培养时，常用诱导或分化培养基，即培养基中含有较多的细胞 分裂素和少量的生长素。 初代培养建立的无性繁殖系包括：茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。 ; 在初代培养的基础上所获得的芽、苗、胚状体和原球茎等，数量都还 不多，也难以直接种植到栽培介质中去，这些培养的材料可统称为中间繁 殖体，它们需要进一步培养增殖，使之越来越多，才能发挥快速繁殖的优 势。 在快速繁殖中初代培养只是一个必经的过程，而继代培养则是经常性 不停的进行过程。但在达到相当的数量之后，则应考虑使其中一部分转入 生根阶段。从某种意义上讲，增殖只是贮备母株，而生根才是增殖材料的 ??流，生产出成品。;继代培养是继初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。旨在繁殖出相当数量的无根苗，最后能达到边繁殖边生根的目的。 继代培养的后代是按几何级数增加的过程。如果以2株苗为基础，那么经10代将生成210株苗。 增殖使用的培养基对于一种植物来说每次几乎完全相同，由于培养物在接近最良好的环境条件，营养供应和激素调控下，排除了其他生物的竞争，所以能够按几何级数增殖。 ;继代培养中扩繁的方法包括： 切割茎段、分离芽丛、分离胚状体、分离原球茎等。;;;; 思考:皮部根和愈伤根哪个利于组织培养？为什么;;; 第四阶段：生根小苗移栽和驯化时期; 试管苗的特点及移栽;试管苗的生长环境; 试管苗由于是在无菌、有营养供给、适宜光照和温度、近100％的相 对湿度环境条件下生长的，因此，在生理、形态等方面都与自然条件生长 的正常小苗有着很大的差异。所以必须通过炼苗，例如通过控水、减肥、 增光、降温等措施，使它们逐渐地适应外界环境，从而使生理、形态、组 织上发生相应的变化，使之更适合于自然环境，只有这样才能保证试管苗 顺利移栽成功。 ;移栽前的准备; B.试管苗炼苗; 试管苗的移栽;试管苗的移栽基质; 提高小苗移栽成活率的方法：; 提高效益的措施; 5.3植物离体快速繁殖的影响因素; 主要内容; 5.3.1 影响组培苗快繁的内因;5.3.1.1 植物材料（外植体）的影响; ; 5.3.1.2 继代培养;(1) 形态发生能力的保持或丧失；;形态发生能力减弱或丧失大多由三个因素造成：; (2) 培养中发生的变异;(3) 继代培养时间长短;(4) 季 节;5.3.1.3 愈伤组织的遗传特性及其生理状态;5.3.1.4 芽的增殖途径;5.3.1.4 芽的增殖途径; 5.3.1.4 芽的增殖途径; 5.3.2影响组培苗快繁的外因; 5.3.2.1 培养基对植物快速繁殖的影响;（1） 无机盐;（2） 糖浓度; （3） 维生素; （4） 生长素和细胞分裂素 ; 激素对植物快速繁殖的影响;激素对植物快速繁殖的影响;（5） 其它有机化合物 ; 5.3.2.2培养条件;5.3.2.2培养条件;5.4 植物离体微繁过程中常见异常现象及其对策;5.4.1 遗传稳定性问题; A 变异的起源及类型; B 影响遗传稳定性的因素;C 提高遗传稳定性，减少变