细胞增殖与分化的调控机制及异常.ppt

1972年 Bishop实验室（法国学者Stehelin）首先制备出32p-src 探针，并以此探针证明鸡及其他禽类细胞以及人类细胞 中均含有与v-src同源的序列，且具有真核基因的特点 （含内含子及外显子）。命名为细胞src（c-src），以后 陆续发现了其他许多种细胞癌基因。 目前，多数学者认为v-onc起源于c-onc。 原癌基因（proto-oncogene） 正常细胞中存在着c-onc样序列，与c-onc的同源性很大，差别极小，但不具转化活性；发生突变后即转为c-onc，具转化活性，因此称原癌基因。 2.癌基因的分类 癌基因产物称癌蛋白（oncoproteins）或转化蛋白（transforming proteins）。可定位于细胞各部位，从功能上看，可以是： ?生长因子类；?生长因子受体类；?蛋白激酶类； ?G蛋白类；?DNA结合蛋白类（转录因子）。 3.癌基因的命名 病毒癌基因 v-src, v-erb-A/B, N-myc, E1A, E1B等。 细胞癌基因 c-src 癌蛋白 p：p150c-abl pp60v-src p160v-gag-abl （二）原癌基因的生理功能 原癌基因实际上是与调节细胞增殖分化密切相关的基因。 1.原癌基因与生长因子 （1）sis基因与PDGF Proto-sis就是编码PDGF B链的基因，而v-sis为proto-sis不完整的变异体，v-sis（p28v-sis）为猴肉瘤病毒癌基因。 PDGF由A、B两链构成，B链N端109位aa和p28v-sis（66～175aa）几乎完全相同； p28v-sis能和PDGFR结合并引起受体的酪氨酸磷酸化，表明p28v-sis和PDGF具相似的生物学活性。 （2）int-2和hst/k-fgf与FGF int基因：MMTV引起肿瘤时，随机整合至鼠基因组时引起一种特异性mRNA的转录，由此克隆出的proto-onc称为int，int-2为其中的一个。 hst为人胃肿瘤（human stomach tumor）中克隆出来的转化基因，编码产物与Kaposi肉瘤DNA转染NIH/3T3细胞后克隆出的k-fgf产物相同，为同一基因。现已发现，int-2、hst基因产物和FGF同源。 2.跨膜生长因子受体 有些癌基因产物位于膜上，为生长因子受体，具一跨膜疏水区，膜内具酪氨酸激酶（TPK）活性，如： ?proto-erbB和proto-neu/erbB2 EGFR； ?proto-fms M-CSFR； ?proto-kit PDGFR； ?proto-ros 胰岛素受体; ?proto-mas 血管紧张素受体等。 3.G蛋白类 p21ras能与GTP结合，具GTPase活性。 4.与核内DNA结合的proto-onc myc jun fos myb等。 （三）原癌基因的激活与肿瘤的发生 1.激活 （1）点突变； （2）插入诱变：逆转录病毒； （3）Gene amplification：拷贝数增加； （4）染色体重排。 2.癌基因在肿瘤发生中的作用 （1）作为生长因子，以自分泌方式刺激细胞生长； （2）作为生长因子受体，仿效受体复合物，在无外源性生长因 子时也能引起细胞增殖； （3）作为生长因子，绕过受体，成为受体与核间信息传递的介导者； （4）作为在核内对生长信号的应答者。 （四）肿瘤抑制基因 肿瘤抑制基因（tumor suporessor gene）又称抑癌基因、抗癌基因（antioncogene）或隐性癌基因（recessive oncogene）等。 是指一些在细胞增殖、分化等过程中起负调节作用的野生型等位基因。丢失或灭活时有致瘤作用。 1.肿瘤抑制基因存在的依据 （1）细胞杂交实验 将正常细胞与恶性细胞融合产生的杂种细胞可出现