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- 2020-04-08 发布于上海
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第十八章 植物转基因技术 ;植物转基因技术:
又称基因重组技术或DNA重组,即将人工分离和修饰过的基因导入植物基因组中,通过导入基因的表达从而引起植物体性状的可遗传的修饰。
凡是外源DNA导入细胞的过程都可
以泛称为转化,包含以下内容:
直接转化;
介导转化;
;直接转化;介导转化;直接转化与介导转化都涉及以下三方面:
1、遗传物质导入植物细胞;
2、外源DNA在植物基因组中的稳定整合;
3、转基因植株的再生。;一 、直接转化;一)目的基因的获得:;(4)通过建立核基因库,然后从基因库中筛选并扩增出目的基因。;二)目的基因的修饰,构成嵌合基因:
嵌合基因中必有启动子(如花椰菜病毒的
35s亚基启动子、19s亚基启动子),目的基因
及终止子。
三)嵌入标记基因或报告基因:
应用较广的是 GUS 基因;绿色荧光蛋白基因。; 基因枪法:
微弹为0.2-2.0um的钨粉或者金粉,用超声波使外源
DNA液均匀的包裹钨粉微粒手枪原理射击。
;
电穿孔转化法:
用短时高脉冲电处理可导致细胞膜出现可恢复性孔隙,
从而发生的渗透点3-4nm为外源DNA进入细胞提供通路。
;
PEG转化法:
PEG转化法和PEG诱导原生质体融合方法相似,同样需要高钙、高pH条件从而将外源DNA插入原生质体并整合。;五)、转化基因
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