补体参与的反应.pptxVIP

实 验 三Part Ⅰ 补体参与的反应Part Ⅱ T细胞数量及其功能检测免疫学教研室王丽娜Email：myx@wfmc.edu.cn主要内容 补体参与的反应 补体的溶血反应---- 免疫血清的制备与应用㈢ 补体结合试验 T细胞及其功能检测 E花环形成试验 淋巴细胞转化试验：形态学方法 3H—TDR掺入法 MTT比色法 T细胞亚群检测：间接免疫荧光法 免疫组化法------SABC－AP法 Part Ⅰ 补体参与的反应 补体激活的三条途径MBL途径经典途径旁路途径细菌+C3IC+C1qMBL+病原体配基膜攻击复合物细胞溶解思考题材料：绵羊红细胞、补体、免疫血清（自制）问题：请设计实验检验你所制备的免疫血清的特异性？1、补体的溶血反应 ----补体参与的反应原理 绵羊红细胞（SRBC）作为抗原与其相应抗体（溶血素）结合后，通过经典途径激活补体，产生膜攻击作用，最后导致红细胞溶解，发生溶血反应。 实验步骤及结果判断孔号 SRBC溶血素补体NS13滴3滴3滴3滴23滴3滴－6滴33滴－3滴6滴43滴－－9滴结果＋－－－阴性溶血阴性溶血2、补体结合试验 ----补体参与的反应原理指示系统溶血反应补体结合试验反应系统补体阳性不溶血 反应体系与结果判断12345反应系统Ab＋＋－－－Ag＋－＋－－补体C＋＋＋＋－NS＋＋＋＋＋ 摇匀，37°C水浴，30mins指示系统溶血素＋＋＋＋