目的基因与克隆载体的体外重组新.pptxVIP

第五章 目的基因与载体的 体外重组 ;基因工程的操作过程;连接时考虑因素;粘性末端连接 平末端连接 末端延伸连接： ;粘性末端连接—单酶切产生的粘性末端的连接（同种酶）;粘性末端连接—单酶切产生的粘性末端的连接（同尾酶）;粘性末端连接—双酶切产生的粘性末端的连接;平末端连接;平末端连接--不同粘性末端的平端连接;粘性末端的更换;末端转移酶（TDT）：在没有模板存在的条件下，能催化dNTP 随机加于DNA分子的3‘-OH端;C 3 ;末端延伸??接—同聚物加尾 （3‘突出末端）;末端延伸连接—同聚物加尾 （5‘突出末端）;人工接头：化学合成的两条互补寡核苷酸连，上面 带有一 至数个限制酶识别位点 作用：加至待克隆的平末端DNA片段两侧，酶切后 产生粘性末端;末端延伸连接—人工接头加尾;DNA衔接物：人工合成的双链寡核苷酸片段，一头为平末端 （与目的基因连接），另一头为特定酶的切后粘 性末端（与载体粘端连接） ;重组率;重组率;重组率;Thank You !