提取脂质的几种方法.docVIP

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
Folch法提取脂质 组织称重。 剪碎组织,按照1g组织加入20ml溶剂比例加入氯仿和甲醇(2:1)混合溶液。混匀15-20min后1500-2000r/min离心5min收集溶液。 溶液加入0.2体积的水(20ml溶液加4ml水)或0.9%NaCl溶液清洗,涡旋几秒钟,以2000rpm离心10min得到两相液面。吸取上清液,用于分析检测神经节苷脂类或小的极性分子。如果有必要(为移除标记分子),用甲醇和水(1:1)清洗两相液交界面1至2次,注意不要冲洗到下层液体内。 收集的下层液即氯仿层含有脂质,用N2吹干氯仿即得脂质。 文献采用正相液相色谱法和大气压化学电离质谱分析测定神经酰胺时说按Folch法,以氯仿和甲醇(2:1,1:1,1:2)三个不同比例来提取脂质,每种混合溶液提取2小时。 Bligh和Dyer的方法(也是我们之前用的方法) 皮肤组织称重,胰酶37℃ 剪碎表皮组织,加入3.75ml氯仿和甲醇(1:2)混合溶液。匀浆15min。加氯仿1.25ml,混匀30s。再加水1.25ml,混匀30s。 1500r/min离心15min,吸取下层氯仿层,收集在棕色小瓶中,N2挥干溶剂,即得总脂质。 注: 本次试验Forch法取两只正常组的雌雄鼠制备两个样,BD法也是取两只正常组的雌雄鼠制备两个样。预先准备好需要的溶剂、移液管、棕色小瓶和离心管(离心管最好用玻璃的)。

文档评论(0)

liushuixian + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档