D-D二聚体测定标准操作程序.docxVIP

XXXX 医院检验科 D-二聚体测定作业指导书 文件编号 制定日期 文件版次 正文页数 附件份数 第一版 5 D- 二聚体测定作业指导书 修订日期 版次 页次 修订内容 第一版 全部 修 订 记 录 发行章 批准 审核 编制 制定部门 检验科 文件持有部门：检验科临检室 1 XXXX 医院检验科 D-二聚体测定作业指导书 D- 二聚体测定 （分析仪器法） 1 实验原理 ：免疫比浊法 当混合标本中含有 D-二聚体时，聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体（ DD5），与交联纤维蛋白降解产 物（D-二聚体）的交联区域结合。交联区域呈立体结构，有两个单克隆抗体表位。总之，一个单 克隆抗体就能触发凝集反应，随后检测浊度的增加。仪器在 575nm处通过对浊度改变的监测，将 吸光度转换成浓度值，由此获得样本中 D-二聚体的量。 2 标本采集 2.1 早晨空腹采血 (空腹 12 小时左右 ), 静脉采血。 2.2 3.8 ％(w/v) 枸椽酸钠 0.2ml+ 静脉血 1.8ml, 混匀。 3 标本存放 1 小时内 (3000r/min × 15min) 分离血浆 , 室温放置不超过 2 小时,2 ～8℃保存不超过 4 小时，长时 间保存需在冰冻条件下， （-70 ℃不超过 6 个月） , 只能冻融 1 次，在 37℃迅速解冻，以减低凝血 因子的消耗，解冻后立即测试。 4 标本运输： 低温条件下运输。 5 标本拒收的标准 : 抗凝剂不符合 , 采血量不准确 , 凝固, 溶血 , 脂血标本不能作测定。 6. 实验材料 : 6.1 德国 Dade Behring Marburg 公司 D-Dimer PLUS 乳胶试剂 , 用 4mlD- 二聚体 PLUS 复溶液溶解一 瓶 D 二聚体 PLUS 试剂，室温（ 15℃~25℃）放置约 5 分钟，并不时混匀。将试剂放于仪器相应的 试剂位置上。未开封试剂 2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂 2～8℃保存不超过 2 天，室温 保存不超过 5 天。 6.2 D-Dimer PLUS 加速剂：用 5ml 蒸馏水溶解，室温（ 15℃~25℃）放置约 15 分钟，并不时混匀。将 试剂放于仪器相应的试剂位置上。使用前，轻轻振荡试剂。未开封试剂 2～8℃贮存到说明书上有 效期，复溶试剂 2～8℃保存不超过 5 天。 6.3 D-Dimer PLUS 复溶液：液体。用于溶解 D-二聚体 PLUS 乳胶试剂。未开封试剂 2～8℃贮存到说 明书上有效期，开瓶后试剂 2～8℃保存不超过 12 周。 6.4 Dade D-二聚体质控血浆 I/II. 用蒸镏水 1ml 溶解后放置 30 分钟, 才能使用或分装。复溶后 , 室温保 存 2 小时,2 ～8℃4 小时。 7. 仪器设备 : 7.1 仪器名称 : Sysmex CA-1500 全自动血液凝固分析仪 7.2 仪器厂家 : 日本 Sysmex公司 2 XXXX 医院检验科 D-二聚体测定作业指导书 7.3 仪器型号 : Sysmex CA-1500 7.4 仪器技术参数 : 7.4.1 速度: 最快检测速度 180 测试/ 小时, 组合检测约 140 测试/ 小时 7.4.2 试剂位 :36 个, 具冷藏功能。 7.4.3 样本位 :50 个, 可自动连续添加。 7.5 仪器校准程序 : 7.5.1 校准频率 : 当方法改变 , 试剂厂家或试剂批号改变 , 仪器维修影响测定结果等情况时 , 必须进行校 准。 7.5.2 校准操作 : 设置标准曲线分析 ( 由仪器提供商指定工程师执行 ) 8. 操作步骤 : 8.1 检查前准备 : 8.1.1 清空废液瓶 , 清空反应杯抛弃槽。 8.1.2 添加足够反应杯 ( 不能超过警告线 ) 。 8.1.3 添加清洁液试剂 , 清洗用蒸馏水等。 8.2 开机 先开打印机再开主机 , 开机后仪器自检 , 约 15 分钟, 屏幕上方“ Not Ready ”变为“ Ready”, 表示 仪器预热完成 , 进入系统准备工作状态 , 可进行测定。 8.3 输入工作清单 : 从主菜单选 Work List →出现第一架样本工作清单输入画面 , 选 ID No Entry 输入第一个样本号→ 按相应实验项目名称键 D-D, 并同时输入此标本的其他测试项目 , 若选“凝血四项 （PT、APTT、Fbg、 TT）”，可按 Profile #1 组合选项选择，选中项目相应位置标记为“○” ，选完项目后按 ENTER确 认，要删除某项目时只需按该项目（按键如 PT○变为 PT-）即可，→用↑↓键，同样输入其他标 本编号项目。 （快速输入可用 Repeat 键，输入重复标本数，复制同样项目的输入。 8.4 放置样本 按 8.3 所设好的工作清单顺序将离心分离好的样