10.4青霉素提取精制工艺过程.pptVIP

微生物制药工艺及反应器 生物工程系讲师： 赵德胜 作业： 1、半合成青霉素的基本方法？ Company Logo Company LOGO 第十章 青霉素的生产 第三节 青霉素生产工艺过程 二、青霉素的提取和精制工艺过程 1. 工艺流程简图 微生物制药工艺及反应器（第十章） 2. 工艺控制 青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。 ⑴ 预处理及过滤 ⑵ 提取 ⑶ 脱色 ⑷ 结晶 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑴ 预处理及过滤 ① 发酵滤液冷却至10℃→  ② 鼓式真空过滤机过滤→ ③ 一次滤液pH6.2-7.2，蛋白质0.05%-0.2%→  ④ 沉淀蛋白质加10%硫酸调pH4.5-5.0，0.05%PPB，0.7%硅藻土助滤剂→ ⑤ 板框过滤机过滤→ ⑥ 二次滤液（澄清透明）→萃取。 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑵ 提取 10℃以下 pH值1.8-2.2 加1/3体积BA1．二次滤液 ——————————————— 卧式离心机（POD）分离————→一次醋酸丁酯（BA）萃取液（青霉素） 微生物制药工艺及反应器（第十章） 10℃以下 pH值6.8～7.42．一次（BA）萃取液———————————— 卧式离心机（POD）分离————→NaHCO3缓冲溶液（青霉素） 微生物制药工艺及反应器（第十章） 10℃以下 10%H2SO4 调pH2.0 3． NaHCO3缓冲溶液———————————— 再加1/3体积BA ————→二次（BA）萃取液（青霉素） 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑶ 脱色 萃取液中添加活性炭，除去色素、热源，过滤除去活性炭。 活性炭150-300g/10亿单位  二次BA萃取液 ——————————————  石棉过滤板 ———→脱色 ——————→ 过滤 ——→ 结晶 萃取条件：为减少青霉素降解，整个萃取过程应在低温10 ℃以下进行。萃取罐冷冻盐水冷却。 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑷ 结晶 萃取液一般通过结晶提纯。青霉素钾盐在醋酸丁酯中溶解度很小，在二次丁酯萃取液中加入醋酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐就结晶析出。然后采用重结晶方法，进一步提高纯度，将钾盐溶于KOH溶液，调pH至中性，加无水丁醇，在真空条件下，共沸蒸馏结晶得纯品。 微生物制药工艺及反应器（第十章） 直接结晶：在二次乙酸丁酯萃取液中加醋酸钠－乙醇溶液反应，得到结晶钠盐。加醋酸钾－乙醇溶液，得到青霉素钾盐。 共沸蒸馏结晶：萃取液，再用0.5 mol/ml NaOH萃取，pH6.4-6.8下得到钠盐水浓缩液。加2.5倍体积丁醇，16－26℃，0.67-1.3KPa下共沸蒸馏。水和丁醇形成共沸物而蒸出。钠盐结晶析出。结晶经过洗涤、干燥后，得到青霉素产品。 微生物制药工艺及反应器（第十章） 下面以青霉素盐溶液结晶普鲁卡因青霉素为例来说明其工艺要求。在结晶过程中应注意控制晶体大小、纯度和形态等要求。 ⑴ 晶种 晶体形态的控制关键在于品种的采用。在结晶开始时加入一定量的晶种，以便在大量结晶前预先增加很多晶核，在结晶过程中这些晶核相互地成长为晶体，这样成长速度快，而每颗晶核上成长的量并不多。从而得到微细的品粒，同时形态也得到了保证。 微生物制药工艺及反应器（第十章） 晶种的质量(即大小、均匀度)好坏，对晶体形态控制有着关键的作用。工艺上要求晶种的形态应椭圆形，直径在2微米左右。如果加入的晶种直径过大，则结晶后生成的晶体相应也大。因此控制晶种的质量，对晶体的形态有着直接影响。 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑵ 温度 温度高能加强分子运动，反应速度快，晶体生长快，形成的晶体颗粒较大；温度低，晶体生长较慢，晶体颗粒较细小。 但普鲁卡因青霉素结晶是放热反应，因此在整个反应过程中温度控制在5—20℃较适宜。温度过高要造成对青霉素的破坏；温度过低会增加反应液的粘度，造成晶体过细，给洗涤过滤工作带来困难，从而影响产品质量。 微生物制药工艺及反应器（第十章） ⑶ 盐酸普