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第九章 G-兼性厌氧杆菌
本章细菌含有3个科及2个关系未确定的属
肠杆菌科
弧菌科
巴氏杆菌科
;第一节 肠杆菌科(有28个属)
共同特征:
1.G-中等大小杆菌,运动者周身鞭毛,无芽胞,无荚膜(个别有),非抗酸染色。
2.需氧兼性厌氧,普通培养基上生长好。
3.糖发酵产酸(+)或产酸产气。
4.接触酶阳性(志贺氏菌除外)。
5.硝酸盐还原试验阳性(欧文氏菌除外)
6.在含0.5%胆盐的培养基上生长。;一、埃希氏菌属
本属有5个种:大肠埃希氏菌,蟑螂~菌,费格森~菌,赫曼氏~菌,伤口~菌。
其中最重要的是大肠~菌,俗称大肠杆菌。
(一)形态及染色特征
G-中等大小杆菌,八根鞭毛,能运动,无芽胞,无荚膜但常有微荚膜。
;(二)培养特性
1.普通培养基上:生长良好,37℃ 24h 形成圆形,光滑,隆起,湿润,半透明灰白色菌落。
2.普通肉汤:均匀浑??,管底有粘性沉淀,管壁有菌环。
3.麦康凯琼脂:红色菌落(沙门氏菌无色)
原理,麦康凯平板含有乳糖有胆盐,分解乳糖的细菌产酸使指示剂变红,胆盐有利于肠杆菌科细菌生长,对其它菌有抑制作用。;大肠杆菌微菌落照片 ;大肠杆菌革兰氏染色照片
大肠杆菌平板菌落照片;4.伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落(沙门氏菌无色)。
原理:伊红,美兰均为指示剂,又能抑G+生长,含有乳糖。大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷,染上红色,再与美兰结合形成紫黑色菌落,不分解乳糖不着色,伊红美蓝不结合,故沙门氏菌无色。
5.远藤氏琼脂:带金属光泽的红色菌落。;6.SS琼脂(沙门氏菌—志贺氏菌分离培养基):红色小菌落。
7.三糖铁(TSI):斜面黄色,底部黄色,不产生H2S。
原理:三糖铁含葡萄糖、乳糖,蔗糖。其中乳糖、蔗糖含量为G的10倍,大肠杆菌三种糖均发酵产酸,足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖,只发酵G产酸,斜面部分先变黄,但产酸量少且接触空气又受到氧化,另外分解含氮物质产碱,所以斜面又变为红色,而下端的酸不被氧化,一直呈黄色。
;(三)生化特征
G 乳 麦 蔗
⊕ ⊕ ⊕ ⊕
靛基质实验:+(I) ; MR(甲基红试验)+(M)
VP(乙酰甲基醇)-(Vi); 柠檬酸基利用试验-(C)
I M Vi C + + - -
硝酸盐还原试验+ 、 H2S -、 尿素分解-
三糖铁:斜面黄色/底部黄色,不产生H2S。;(四)抗原构造及血清型:
大肠杆菌抗原主要有O抗原(菌体抗原,有173种),K抗原(被膜或荚膜抗原,有80种),H抗原(鞭毛抗原,有56种)。
1.O抗原:存在于细胞壁中,由脂多糖(LPS)中的特异性多糖侧链组成,O抗原是S型菌的一种耐热菌体抗原,121℃ 2h不破坏其抗原性,当S型菌丢失特异性多糖侧链时,即变为R型菌,O抗原也随之丢失。
;2.K抗原:位于菌体表面的荚膜或被膜中,在80种K抗原中,除K88,K99是两种蛋白质抗原外,其余均为多糖。具有K抗原的菌株不能被其相应的抗O血清所凝集叫“O不凝集性”。因为K抗原可抑制活细菌在相应抗O血清中的凝集反应,这样可作为判定大肠杆菌是否具有K抗原的一个标准。
据耐热性不同,K抗原又分为:L、A、B 三型。;L型K抗原:对热敏感100℃ 1h破坏其抗原性,并失去与相应抗体的结合力和凝集性,位于被膜中,偶见于荚膜中。
A型K抗原:耐100℃ 1h ,但121℃ 2.5h破坏其抗原性和O不凝集 性,但保留与相应抗体结合能力。位于荚膜中,抗A血清可使具有相应A抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。
B型K抗原:100℃ 1h 破坏其抗原性与相应抗体的凝集性,但保留其与相应抗体结合力。;3.H抗原:不耐热,是一种蛋白质,抗原性好,80℃破坏其抗 原性,每一个有动力的细菌仅含一种H抗原,且无两相变异,无鞭毛细菌无H抗原。根据大肠杆菌抗原的鉴定,可用O∶K∶H排列表示其血清型即大肠杆菌抗原结构式:
O8∶K23(L)∶H19表示该菌具有O抗原8,L型K抗原23,H抗原为19。
;(五)致病性
大多数是在正常条件下不致病的共栖菌,但特定条件下,如移位侵入肠外组织或器官可致肠杆菌病;但也有极少数是病原性大肠杆菌。;据毒力因子与发病机制不同可分五类:
(1)产肠毒素大肠杆菌(ETEC):引起人和幼畜腹泻(黄痢)。
(2)产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC):引起猪水肿病,犊牛出血性肠炎。
(3)肠致病性大肠杆菌(EPEC):兔腹泻,猪腹泻。
(4)败血性大肠杆菌(SEPEC):猪,犊牛败血症,鸡的大肠杆菌败血症,气肠炎,脑膜炎,肠炎,肉芽肿。
(5)尿道致病性大肠杆菌(UPEC):犬、猪的尿道感染。
;(一)产肠毒素
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