蛋白质在膨胀床吸附层析剂的静态和动态吸附性能.pdfVIP

胡洪波等 　蛋白质在膨胀床吸附层析剂的静态和动态吸附性能 ·37 · 蛋白质在膨胀床吸附层析剂的 静态和动态吸附性能① 胡洪波 ② 　姚善泾 ③ 　朱自强 (浙江大学化工学院生物化工研究所 , 杭州 3 10027) ( ) 以牛血清白蛋白 B SA 为 目标蛋白, 考察膨胀床用离子交换树脂 Streamline D EA E 的静态和动 态吸附性能 , 并和离子交换树脂 D EA E Sep harose FF 进行比较 , 实验发现两者的静态吸附性能相似 , 而动态吸附性能差别较大 。根据动态吸附数据计算出液膜扩散系数和孔内扩散系数 。 关键词 : 膨胀床 　吸附　离子交换 　扩散系数 　牛血清白蛋白 　　膨胀床吸附层析技术 自 90 年代被开发以来 , 司 。 由于在减少操作步骤 , 提高产品收率 , 降低纯化费 1 . 2 　实验方法 用和资本投入方面的优势 , 因而在生化分离中的应 1 . 2 . 1 　蛋白质含量的测定 用越来越广泛[ 1～7 ] 。 B SA 用紫外分光光度法分析 , 波长为 280nm 。 St reamline D EA E 是 Amer sham Pharmacia 1 . 2 . 2 　静态吸附性能 Biotech 公司专门为膨胀床设计的弱阴离子交换层 用缓冲液配制8 . 0 mg/ mL 的标准 B SA 溶液 , 析介质 , 与常用的离子交换层析剂不同的是 , 它有 把其 稀 释 成 不 同浓 度 的溶 液 , 取 各 浓 度 溶 液 一惰性石英砂内核 , 6 %的交联琼脂糖被包在石英 15mL , 置于 25mL 具塞锥形瓶内, 加入 1mL 与缓 砂核外 , 并且其密度和粒径有一分布 。在利用该层 冲液1 ∶1混匀的吸附剂 , 置于恒温水浴 16 ～17h , 析剂进行分离时 , 研究静态和动态平衡吸附行为可 让其达到平衡 。将溶液离心 , 取上清液 , 测定 以为考察层析剂对产物的吸附量和研究层析过程的 B SA 的浓度 , 再根据物料衡算求得吸附剂吸附的 传质速率 , 提供一些必要的参数 。由于 目前尚无计 B SA 量 。 算具有粒径分布且含惰性内核吸附剂的吸附动力学 1 . 2 . 3 　动态吸附性能研究 模型和方法 , 给描述动态吸附过程带来了困难 。 动态吸附实验装置如图 1 所示 。将吸附池置于 本文拟以B SA 为 目标蛋白, 研究其在 St ream 恒温水浴中 , 由一恒流泵连接吸附池和紫外检测 line D EA E 上的静态和动态吸附性能 , 并与另一种 仪 。　恒流泵以恒定的流速通过紫外检测仪的检测 层析剂 D EA E Sep haro se FF 的吸附性能进行比较 , 试图建立起蛋白质在含惰性内核层析剂吸附性能的 数学模型 , 计算吸附过程的平衡热力学参数和扩散 系数 。 1 　实验材料及方法 1 . 1 　实验材料 B SA : 华美生物工程 公司 ; D EA E Sep haro se FF , St reamline D EA E : 瑞典 A . Pharmacia Biotech 图1 　动态吸附实验装置示意图 公司 ; 低温恒温槽 : 宁波市机电工业研究设计院; Fig. 1 　Equipment f or determining the U V - 1 紫外检测仪 : 瑞典 A . Pharmacia Bi