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2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 4 、结 果 ? 4.1 补肾排毒合剂对慢性肾衰大鼠体重的影响 ? 各组间造模前体重无明显差异； ? 用药后 6 周，模型组体重增加值显著低于正常组 ? 治疗组体重增加值高于模型组，与正常组相比无显著性 差异 表 1 补肾排毒合剂对大鼠体重的影响（± s ） 注：与正常组比， * P ＜ 0.01 ， **P ＞ 0.05 ；与模型组比， # P ＜ 0.05 分 组 n （只） 造模前 用药前 用药后 6 周 体重增加值 正常组 15 298.67 ± 44.71 380.53 ± 29.93 484.53 ± 56.69 185.87 ± 41.20 模型组 20 289.81 ± 36.76 399.24 ± 47.05 440.05 ± 48.90 150.24 ± 31.46 * 治疗组 22 285.54 ± 24.42 417.45 ± 49.05 466.59 ± 53.04 181.05 ± 55.13**# 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 4.2 补肾排毒合剂对慢性肾衰大鼠血生化的影响 ? 三组间大鼠造模前血生化结果显示 Bun 、 Cr 、 Alb 、 TC 、 TG 无显著性差异 ? 造模组和用药组血生化检验结果示 Bun 、 Cr 值明显升高， Alb 明显下降，符合慢性肾衰营 养不良模型 ? 经补肾排毒合剂灌胃 6 周，治疗组 Alb 、 TG 明 显高于模型组 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 表 2 补肾排毒合剂对慢性肾衰大鼠血生化的影响 （± s ） 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 二 . 补肾排毒合剂对慢性肾衰竭大鼠瘦素、瘦素 受体及其神经肽 Y 表达的影响 （ RT-PCR 检测技术） ? 标本收集 ? 三组大鼠均于术后 12 周行脱颈椎处死，取头背部“ T ” 字型切开皮肤，去掉颅骨，取出整个脑组织，沿矢状面 切开，保存。刨开腹腔，取出脂肪组织和左肾组织。将 取出的组织放于用 DEPC 浸泡高压消毒过的青霉素小瓶内， 封闭。急送 -70 ℃ 低温冷柜内保存 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 ? 观察指标：大鼠组织 Leptin 、瘦素受体及其 NPY 的基因表达（ RT-PCR 检测） ? 大鼠组织总 RNA 提取 ? cDNA 合成 ? 引物和探针的设计合成 ? PCR 扩增 ? 膜上杂交 结 果 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 Leptin 在脂肪组织的基因表达结果 ? 三组脂肪组织 LeptinmRNA 表 达 水平以 Leptin 光密 度 值 /HPRT 光密度 值表示，结果分别为 0.784 ± 0.308 、 0.585 ± 0.207 、 0.730 ± 0.244 。 ? 见图 1 ? 2 组的表达低于 1 、 3 组，两两比较均有显著性 差异 ? 1 组和 3 组比较 LeptinmRNA 表达无显著性差异 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 图 1 Leptin RT － PCR 结果 3 组脂肪组织 leptin mRNA 表达水平比较： 分组 1 、 2 、 3 分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组标本 leptin 光密度值 /HPRT 光密度值的平均值 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 Leptin 受体（ Ob-Ra ）在肾组织的基因 表达结果 ? 三组肾脏组织 Ob-Ra mRNA 表达结果分别为 1.15 ± 0.29 、 0.85 ± 0.23 、 0.96 ± 0.25 ? 组 2 、组 3 与组 1 两两比较均有显著性差异，提示慢 性肾功能衰竭后肾脏组织 Ob-Ra mRNA 表达水平明显降 低 ? 2 组和 3 组比较： Ob-Ra mRNA 表达无显著性差异 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 2020/4/10 健脾补肾，和解泄浊方改善慢性肾功能衰竭营养不良作用机制的研究 Leptin 受体 （ Ob-Ra 及 Ob-Rb ）、 NPY 在脑组织 基因 表达结果 ? 三组脑组织 Ob-Ra mRNA 的表达结果分别为 0.98 ± 0.36 、 1.26 ± 0.38 、 1.04 ± 0.33 ?