志贺氏菌检验详细版.pptVIP

智能厌氧微需氧培养系统 * （二）分 离 培 养 取增菌后的GN增菌液或志贺氏增菌肉汤分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或RF志贺氏菌显色培养基平板上 于36 ℃?1 ℃培养20 h～24 h，观察各个平板上生长的菌落形态 若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48 h再进行观察。 * 菌 落 特 征 MAC琼脂 ：无色至浅粉红色，半透明、光滑、 湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径2～3 mm XLD琼脂 ：粉红色至无色，半透明、光滑、 湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径1 ～2 mm * RF志贺氏菌显色琼脂 ：白色，不透明、圆形、边缘不整齐，直径1 mm～3 mm，菌落周围琼脂颜色变为紫红色 * 志 显 1 宋内氏典型菌落 XLD * 2 福氏典型菌落 志显 XLD * XLD 3 鲍氏典型菌落 志显 * XLD 4 痢疾典型菌落 志显 * 5 熟肉制品中宋内的分离效果 RF志显 XLD * 志显 6 蔬菜制品中宋内分离效果 XLD * 志显 7 鲍氏在生肉中的分离效果 XLD * 8 熟肉制品中福氏的分离效果 志 显 * （四）初 步 生 化 选取平板上5个或5个以上可疑菌落接种TSI、葡萄糖半固体、营养琼脂斜面，36 ℃?1 ℃培养20 h～24 h， 观察结果。 培养物中出现以下情况可以弃去 a.在三糖铁琼脂斜面上蔓延生长 b.发酵乳糖或蔗糖 c.不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的 d.产气的 e.产生硫化氢 f.有动力的培养物 * 初步生化:三糖铁（TSI） 现象 说 明 底层 黄色 葡萄糖阳性 红色或不变色 葡萄糖阴性 黑色 产H2S 气泡 产气 斜面 黄色 乳糖和（或）蔗糖阳性 红色或不变色 乳糖和（或）蔗糖阴性 志贺氏菌都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生H2S。 如图中2号管的反应. * 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 精选 志贺氏菌的检验 * 一、流行病学简介 一种古老的肠道传染性腹泻。19世纪曾出现全世界菌痢的大流行。 1899年，日本人志贺氏首先发现菌痢是由痢疾杆菌引起。 第一次世界大战期间（1914-1918年），德国死于痢疾者约4万余人，并进一步证实痢疾杆菌是菌痢流行的病原。 * 细菌性痢疾历年来一直是我国夏秋季发病率最高的肠道传染病。 近年来报道非洲及中美洲流行的痢疾志贺菌病死率达5%-15%。 我国属发展中国家，人民的生活条件虽然在不断改善，但由于部分地区卫生知识普及不够，食品卫生管理、监督不力，使得志贺菌的感染在我国传染病中多年来一直处于较高的地位。 * 每年均有志贺菌感染暴发的报告，每次暴发的发病人数在数十人到上千人不等。多数由于食物和饮水污染引起。 1994年5月11日，江苏省无锡市发生一起26所小学的学生因课间餐食用豆奶导致1345人食物中毒的事故，后经调查是一起志贺菌和致病性大肠杆菌混合感染引起的食物中毒，此次爆发波及范围之大，发病人数之多，在我国历史上颇为少见。 * 志贺菌致病力强，少量细菌进入人体即可引起发病。是否发病，取决于细菌数量、致病力（粘附、侵袭力、毒素）和人体的抵抗力。 各种志贺菌都可以产生强烈的内毒素，是引起全身毒血症的主要因素。志贺菌还可产生外毒素（志贺毒素），具有神经毒、细胞毒和肠毒性作用，能引起更严重的临床表现如溶血性尿毒综合症等。 * 二、生物学特性 （一）、形态与染色 革兰氏阴性短杆菌、无荚膜，无芽胞，无鞭毛 2~3um*0.5~0.7um * （二）、培养特性 1、需氧或兼氧性厌氧，最适温度37℃，PH7.2~7.4 2、在普通琼脂和SS平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、在中等大小的菌落 3、宋氏志贺氏菌菌落较大，较不透明，粗糙而扁平，在SS平板上可迟发酵乳糖，菌落呈玫瑰红色。 4、在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。 * （三）、生化反应 1、发酵葡萄糖，产酸不产气，除宋氏志贺氏菌外，均不发酵乳糖。 2、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷。 3、不产生H2S，不分解尿素，V-P试验阴性，不能利用柠檬酸盐。 4、甲基红阳性。 * （四）、抗原结构 1、抗原构成： O抗原： 群特异性抗原：A、B、C、D K抗原：除B群外，一般有K抗原 * 2、志贺氏菌的分群与血清型 志贺氏菌分为四群： A群（痢疾志贺氏菌）：1~10型 B群（福氏志贺氏菌）：1~6型+X、Y两个变种， C群（鲍氏志贺氏菌 ）：1~15型 D群（宋内氏志贺氏菌） ：1个型 * 三、志贺氏菌检验GB 4789.5-2012 1.