总氮的测定实训指导书.docVIP

《水环境监测》实训指导书 实训项目名称 水质总氮的测定 学时 4学时 实训班级 课次 实训时间 实训目的 熟悉高压蒸汽灭菌器的使用方法 掌握紫外可见分光光度计的使用方法 掌握水中总氮测定的方法和步骤 1.原理 在?120～124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫 外分光光度法于波长?220nm?和?275nm?处，分别测定吸光度?A220?和?A275，按公式（1）计算 校正吸光度?A，总氮（以?N?计）含量与校正吸光度?A?成正比。 A＝A220－2A275（1） 2.仪器 紫外分光光度计：具?10mm?石英比色皿。 高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于?1.1～1.4kg/cm2；最高工作温度不低于?120～ 124℃。 具塞磨口玻璃比色管：25ml。 一般实验室常用仪器和设备。 3.试剂 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水（6.1）。 无氨水 每升水中加入?0.10ml?浓硫酸蒸馏，收集馏出液于具塞玻璃容器中。也可使用新制备的 去离子水。 盐酸溶液：1+9。 硫酸溶液：1+35。 氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=200g/L 称取?20.0g?氢氧化钠（6.2）溶于少量水中，稀释至?100ml。 氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=20g/L 量取氢氧化钠溶液（6.9）10.0ml，用水稀释至?100ml。 碱性过硫酸钾溶液 称取?40.0g?过硫酸钾溶于?600ml?水中（可置于?50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取?15.0g?氢氧化钠溶于?300ml?水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至?1000ml，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。 硝酸钾标准贮备液：ρ（N）＝100mg/L 称取在?105～110℃下烘干?2h，在干燥器中冷却至室温的基准试剂硝酸钾?0.7218g?溶于适量水，移至?1000ml?容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。加入?1～2ml?三氯甲烷作为保护剂，在?0～10℃暗处保存，可稳定?6?个月。也可直接购买市售有证标准溶液。 硝酸钾标准使用液：ρ（N）＝10.0mg/L 量取?10.00ml?硝酸钾标准贮备液（6.12）至?100ml?容量瓶中，用水稀释至标线，混匀， 临用现配。 4.测定步骤 校准曲线的绘制 分别量取?0.00、0.20、0.50、1.00、3.00?和?7.00ml?硝酸钾标准使用液于?25ml具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮（以?N?计）含量分别为?0.00、2.00、5.00、10.0、30.0和?70.0μg。加水稀释至?10.00ml，再加入?5.00ml?碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用纱布和线绳扎紧管塞，以防弹出。将比色管置于高压蒸汽灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至?120℃开始计时，保持温度在?120～124℃之间?30min。自然冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀?2～3?次。 注?1：若比色管在消解过程中出现管口或管塞破裂，应重新取样分析。 每个比色管分别加入?1.0ml?盐酸溶液，用水稀释至?25ml?标线，盖塞混匀。使用10mm?石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长?220nm?和?275nm?处测定吸光度。零浓度的校正吸光度?Ab、其他标准系列的校正吸光度?As?及其差值?Ar?按公式（2）、（3）和（4）进行计算。以总氮（以?N?计）含量（μg）为横坐标，对应的?Ar?值为纵坐标， 绘制校准曲线。 Ab＝Ab220－2Ab275 （2） As＝As220－2As275 （3） Ar＝As－Ab （4） 式中： Ab?——零浓度（空白）溶液的校正吸光度； Ab220?——零浓度（空白）溶液于波长?220nm?处的吸光度； Ab275?——零浓度（空白）溶液于波长?275nm?处的吸光度； As?——标准溶液的校正吸光度； As220?——标准溶液于波长?220nm?处的吸光度； As275?——标准溶液于波长?275nm?处的吸光度； Ar?——标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。 测定 将采集好的样品贮存在聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶中，用浓硫酸调节?pH?值至?1～2， 常温下可保存?7d。贮存在聚乙烯瓶中，－20℃冷冻，可保存一个月。 取适量样品用氢氧化钠溶液（5）或硫酸溶液（3）调节?pH?值至?5～9，待测。 量取?10.00ml?试样于?25ml?具塞磨口玻璃比色管中，按照步骤1进行测定。 注?2：试样中的含氮量超过?70μg?时，可减少取样量并加水稀释至?10.00ml。 空白试验 用?10.00ml?水代替试样，按照?9.2?步骤进行测定。 5、结果计算与表示 结果计算 参照公式（2）