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整合素特异性结合肽筛选及初步鉴定李雪松吴虹晔熊燕李晓武董家鸿第三军医大学西南医院肝胆外科研究所重庆解放军总医院肝胆外科北京摘要目的应用噬菌体随机肽库展示技术筛选能与整合素分子具特异性结合功能的小肽分子并对其功能进行初步鉴定方法根据整合素分子胞外配体结合区域的晶体结构及蛋白质序列设计号条短肽并作为筛选配基分别经过三轮吸附洗脱扩增后鉴定阳性克隆测序和分析粘附试验进一步分析化学合成多肽的功能结果经轮亲和筛选后噬菌体克隆得到有效富集以号肽为代表鉴定显示个阳性克隆能与号合成短肽有较强结合活性进行测序多重序
整合素αvβ3 特异性结合肽筛选及初步鉴定
李雪松1 吴虹晔1 熊燕1 李晓武1 董家鸿2 (第三军医大学:1西南医院肝胆外科研究所,重庆 400038,2解放军总医院肝胆外科,北京 100037)
摘要 目的:应用噬菌体随机肽库展示技术筛选能与整合素αvβ3分子具特异性结合功能的小肽分子,并对其功能进行初步鉴定。方法:根据整合素αvβ3分子胞外配体结合区域的晶体结构及蛋白质序列设计①─⑤号5条短肽,并作为筛选配基,分别经过三轮“吸附-洗脱-扩增”后,ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序和分析,粘附试验进一步分析化学合成多肽的功能。结果:经3轮亲和筛选后,噬菌体克隆得到有效富集,以⑤号肽为代表
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