《生物技术概论》第3章3.8发酵工程-培养基.ppt

（Ⅰ）四环素 C22H24N2O8 R=R＂=H，R＇=CH3 （Ⅱ）土霉素 C22H24N2O9 R=H，R＇=CH3，R＂=OH （Ⅲ）金霉素 C22H23ClN2O8 R=Cl，R＇=CH3，R＂=H （Ⅳ）去甲基金霉素 C21H21ClN2O8 R=Cl，R＇= R＂=H 水分 水是细胞的组成成分，占生活 细胞总量的90%左右。 水的有效性常以水活度值Aw表 示。 微生物一般在Aw为0.60～0.99 的条件下生长。 水分是培养基中必不可少的组成成分。 九、水分 水分的作用 起到溶剂与运输介质的作用。 参与细胞内一系列化学反应。 维持生物大分子稳定的天然构象。 维持细胞自身正常形态。 水合、脱水作用控制由多亚基组成 的结构。 水的比热高，是热的良好导体。 水分的种类 水质检查 深井水、自来水、地表水、 蒸馏水、合成水、去离子水等。 定期对水的 pH、溶解氧、可溶性固体、污染程度、矿物质组成和含量进行测定。 消沫剂的作用 消除泡沫，防止逃液（培养液向罐外溢出）和染菌。 消沫剂的种类 动、植物油： 玉米油、豆油、鲸鱼油、猪油 化学消沫剂（高分子化合物）： GP： 聚氧丙烯甘油 GPE： 聚氧乙烯氧丙烯甘油 （ GPE俗称泡敌） 十、消沫剂 第二节 培养基的种类 物质来源 物理状态 用 途 合成培养基、复合培养基 固体培养基、液体培养基 孢子培养基、种子培养基、发酵培养基、补料培养基 合成培养基（ synthetic medium ） 是由化学成分明确、稳定的组分所构成的培养基。 特点：营养成分单一、实验重现性好，价格昂贵。 复合培养基 （complex medium ） 是由化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成的培养基。 特点：营养丰富，价格低廉，原材料存在批间差异。 一、合成培养基和复合培养基 固体培养基（ solid medium ） 是加入一定量的凝固剂（如琼脂等）的培养基。用于菌种的培养、分离、无菌试验和菌种保藏。 液体培养基（liquid medium ） 是未加任何凝固剂的培养基。通过振荡或搅拌使营养物质混合均匀、温度均一，增加通气量。 二、固体培养基和液体培养基 1. 孢子培养基 （spore medium ） 供繁殖孢子用的培养基。 麸皮培养基、 大（小）米培养基、合成V号培养基等。 三、孢子培养基、种子培养基、发酵培养基和补料培养基 孢子培养基的作用 使菌体生长良好 产生较多优质孢子 不易引起菌种的变异 对孢子培养基的营养要求 碳源、氮源浓度要低 无机盐适量 适合的 pH和湿度 例 当酵母膏或酪蛋白氨基酸浓度 > 0.5%时，灰色链霉菌（S.griseus）就完全不生长孢子。 2. 种子培养基（seed medium ） 是供孢子发芽和大量繁殖菌（丝）体用的培养基。 种子培养基的作用 进行种子扩大培养，增加细胞数量，使菌体长成年轻、代谢旺盛、活性高的种子。 对种子培养基的营养要求 营养成分要比较丰富和完全，易被菌体吸收利用 氮源和维生素含量偏高一些 适量的无机盐和微量元素 维持一定的 pH 营养物质的总浓度以略稀薄为宜 最后一级种子培养基的营养成分要尽可能接近发 酵培养基。 3. 发酵培养基（fermentation medium ） 是供菌种在进一步的生长繁殖后合成目的产物用的培养基。 发酵培养基的作用 使种子转种后迅速生长达到一定的菌丝浓度，迅速合成所需的目的产物。 对发酵培养基的营养要求 营养成分要适当丰富和完全 粘度适中 碳氮比（C/N）合适 一次性投料要保持 pH 相对稳定 添加对产物合成有利的物质如前体、诱导物等 控制原材料质量 碳氮比（C/N） 是指培养基中元素碳与元素氮的比值。 四环素发酵M：C/N=25：1 链霉素发酵M：C/N=5：3 发酵培养基中的碳氮比对产物合成的影响 C/N太低：（C少、N多） 菌体旺盛生长，但能量不足，易造成菌体提前衰老自溶，影响产物的积累。 菌体繁殖数量少，不利于产物的积累。 C/N太高：（C多、N少） 菌体大量繁殖导致菌浓增加，培养液黏度增加，溶解氧浓度下降，导致异常代谢，影响产 物合成。 C/N合适：（C低、N低） 菌体合成量少，产物合成能力下降。 C/N合适：（C高、N高） 4. 补料培养基（fed medium ） 补料培养基作用 在补料分批发酵的过程中，间歇或连续补加的含各种必要营养物质的新鲜培养基。 稳定发酵工艺条件，有利于产生菌的生长和代谢，延长发酵周期，提高生产水平。 补料培养基