拟南芥bZIP23基因过量表达载体的构建及过表达植株的筛选_顾菊.pdfVIP

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2020-05-26 发布于广东
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拟南芥bZIP23基因过量表达载体的构建及过表达植株的筛选_顾菊.pdf

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DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.14.007 安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 20 14 ，42 (14 ):4 199 － 420 1 责任编辑石金友责任校对李岩拟南芥bZIP23 基因过量表达载体的构建及过表达植株的筛选 * ，，，，顾菊韩娇董万春阳立波曹树青 ( ， 230009) 合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥［］ bZIP23 ， bZIP23 ，。［摘要目的以拟南芥为材料克隆基因构建基因的过量表达载体和筛选过表达植株为验证其功能奠定基础方］ＲNA ＲT-PCＲ bZIP23 ， T4 DNA ， bZIP23 35S 法提取拟南芥总和克隆基因用限制性内切酶切割和连接酶连接使基因连接到强启动子 pAＲT27 ; Trans1-T1 ， PCＲ，。的载体上将连接产物转化到感受态细胞中筛选阳性单克隆进行菌落鉴定并测序验证获得重组质粒将该 GV3101 ，。［］ PCＲ DNA ，重组质粒电激转化至根瘤农杆菌菌株浸花法转化拟南芥野生型植株结果通过单菌落鉴定和测序结果显示 bZIP23 35S ， ; 。［］基因与过量表达载体已连接获得了重组载体抗性筛选与遗传鉴定获得相应的转基因过量表达阳性植株结论构建的过量表达载体及筛选得到的过量表达植株为验证 bZIP23 基因功能奠定了基础。关键词拟南芥( Arabidopsis athaliana) ; bZIP23; 互补和过量表达载体; 转基因植株中图分类号 Q 754 ; S 188 文献标识码 A 文章编号 0517 － 6611( 2014) 14 － 04199 － 03 Construction of Arabidopsis Gene bZIP23 Overexpression Vector and Screening of Expression Plant GU Ju ，CAO Shu-qing et al ( School of Biotechnology and Food Engineering ，Hefei University of Technology ，Hef