DB1307_T 300-2020 “张杂谷”品种分子鉴定技术规程(张家口市).pdfVIP

B22 司每 r酬品酣睡醋程 ;佳 标 张 结飞 万 口 DB1307/T 300-2020 哥哥张杂谷刊品种分子鉴定技术规盟 2020隅。卜06 发布 2020-01-21 实拖 张家口市市场监督管理局发布 DB1307/了 300-2020 自IJ 罔 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起中。 本际准自张家口市农业科学院提出台 本标准起耶单位:张家口市农业科学院、北京市农林科学院飞河北边天农业科技有限公司O 本样准主要起草人:赵;台海、魏邱、李双东、范光宇飞王风格、赵久然、易红梅、二EE豆、叶时~， 京军、朱成平、刘再阳、杨建勇、赵芳、张晓磊、冯小磊、晓明、三上:峰、史高富、宋国亮、王德权飞 张雅莉飞李改{虽\张文英飞邱风命、裴晶晶。 DB1307/τ30在一约20 重重张杂谷品种分子鉴定技术规程 ?范留 本际准规远了采用做卫星际i己进行张杂谷品种分子鉴定的术语和主义、原理、仪器设备、试齐。 及溶液配制、号!物信息、参照品种信息、提作程序、数据记录与统计、判定规则等技术要求。 本再j性运用于张杂谷品种分子，，-l-þ~ ~0 2 术语和定义 下列束语和定义适用于本文件O 2. 1 中真t 台 l 物i 口口边 中优先边用的一套 SSR Csimple sequen∞ rep毡at) 引物啻 多态性高、 性好等特点。 2国 2 参照品种 所用的 SSR 标记能格扩增出稳定、;南晰、可辨的等位变异的品种。参照品种用于辅助确定待测样 品的等位变异?校正实验操作、仪器设备的系统误差。 3 原理 组DNA巾简单重复序列的重复次数存在差异啻利用微卫星标 æ子不!可谷子品种遗传组成不再? 记技术可鉴定不同谷子品种及来源G 4 仪器设备 仪器设备见附录Ao 5 试齐IJ 及溶液配器IJ 试剂及洛液配制见附录Bo 6 引物信唐、 lJ l 物信息接G引物名单及序列表见附录C ，核JG 号!物等位变异等相关信息见附录L 7 参照品种借 参照品种信忠见附录Eo DB1307/T 300-2020 8 操作程序 8. 1 取样 送验样品可为种子、幼苗、叶片、果穗等组织或器官。对谷子材料随机数取至少5个个体组成混合 样品进行分析O 8. 2 DNA 提取 8.2.1 CTAB 提取法:幼苗或叶片约 200 mg ~300 mg，置于 2.0 mL 离心管，力日液氮冷冻，充分研磨，或 取种子充分磨碎，移入 2.0 n1L 离心管:每管加入 700μL 65 oc 预热的 CTAB 提取液后，充分混合， 65 oc 保温 60 min，期间多次颠倒泪匀;每管加入等体积的三氯甲:皖/异戊醇混合液，充分混合后，静置 10 min; 12000 叩m 离心 15 min，耳叉上清液，加入等体积预冷的异丙醇