实验六+霉菌形态观察.ppt

实验六+霉菌形态观察 实验六 霉菌的小培养和形态观察 1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 2．了解四类常见霉菌的基本形态 一、实验目的 二、实验原理 霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形的丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。 霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。 载玻片培养观察法： 用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三、实验材料 1．菌种：黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯琼脂平板培养物。 2．培养基：土豆琼脂或察氏琼脂乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等 3．仪器或其他用具：平皿，盖玻片，U形玻棒，解剖刀，20%的甘油以及显微镜等。 霉菌小培养 四、实验步骤 1、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于121℃灭菌30min，烘干备用。 2、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂（或察氏琼脂）培养基6-7ml注入另一块灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成0.5-1cm2的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每块放两片）。注意无菌操作 3、接种：用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块的边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。 4、培养：现在平皿的滤纸上加3-5ml灭菌到20%的甘油（保持湿度），盖上平皿，28℃培养。 5、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜观察。 a.观察黑根霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊）： 根霉 假根 孢囊孢子（sporangiospore） b.观察毛霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认孢囊梗、孢子囊）： c.观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认足细胞、分生孢子梗和分生孢子）： 黑曲霉 足细胞 d.观察青霉菌丝分隔和分生孢子着生情况 （着重辨认帚状分支的分生孢子梗）： * * 由气生菌丝顶端分化成特殊囊状结构—孢子囊（sporangium)形成的孢子。 产生孢子囊的菌丝称孢囊梗（sporangiophore) 1、孢囊孢子 由于生于孢子囊内，又叫内生孢子。 它是由气生菌丝顶端膨大形成特殊囊状结构—孢子囊，孢子囊逐渐长大，在囊中形成许多核，每一个核外包以原生质并产生细胞壁，形成孢囊孢子。带有孢子囊的梗称孢子囊梗，孢子囊梗伸入到孢子囊中的部分叫囊轴或中轴。孢子囊成熟后释放出孢子。例藻状菌纲毛霉目及水霉目一些属以这种方式繁殖. Zygomycete Asexual Reproduction Zygomycete fungal mycelium is coenocytic. At the onset of sporulation large amounts of aerial hyphae are produced. The tips of these aerial hyphae fill with cytoplasmic contents, and the nuclei undergo repeated mitosis. Around each of the nuclei cytoplasm and organelles collect, and by the formation of copious vesicles from the Golgi, each nucleus becomes isolated from the next by a plasma membrane. Within the spaces created by this cytoplasmic cleavage, spore walls begin to form, again by the fusion of Golgi vesicles containing cell wall monomers and enzymes with the spore membrane. A sporangium forms. As these events occur so