实验七 水体铵态氮、亚硝态氮和硝态氮的测定.ppt

制作标准曲线制作（由老师负责完成） 在 6个清洁、干燥的蒸发皿内分别移入硝酸盐氮标准使用液0、0.50、1.00、2.00、3.00 、5.00 mL，以氢氧化钠溶液调节pH至微碱性（pH≈8），置水浴上蒸发至干。 玻棒研磨 冷却后加入 酚二磺酸试剂1.0 mL 再研磨一次 放置10 min 转移至比色管 410 nm处比色 溶液呈黄色 管号 1 2 3 4 5 6 ρ/(mg/L) 0 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 VS /mL 0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 放置片刻 加10ml纯水 加3~4mL 氢氧化钠 定容至标线 样品测定 将过滤后的水样50.0 mL置于干燥的蒸发皿内，以氢氧化钠溶液调节pH至微碱性（pH≈8），置水浴上蒸发至干。 玻棒研磨 冷却后加入 酚二磺酸试剂1.0 mL 再研磨一次 放置10 min 转移至比色管 410 nm处比色 溶液呈黄色 放置片刻 加10ml纯水 加3~4mL 氢氧化钠 定容至标线 所有实验组水样集中比色 （五）结果分析与计算 实验七 水体氨态氮、亚硝态氮和硝态氮的测定 一、氨态氮的测定—纳氏试剂法Nesslers reagent Spectrophotometric 实验目的 实验原理 实验仪器和试剂 主要操作步骤 结果与计算 结果分析 （一）实验目的 复习分光光度计的使用 学习其中一种比色法测定水中氨氮含量的原理和操作方法 （二）实验原理 纳氏试剂是碘化汞钾（K2HgI4）的强碱性溶液，它能与氨氮反应生成棕色的难溶络合物，浓度很小时，在水中以胶态形式存在，呈现为橙黄色。反应如下式所示： （三）主要操作步骤 样品预处理（凝聚法） 2.0 mL硫酸锌溶液 200 mL水样 2~3滴NaOH溶液 中性滤纸过滤 于250 mL锥形瓶 弃去最初滤出的25 mL滤液 混匀 标准曲线及样品的制作与测定 取6支50 mL具塞比色管，分别按下表的量加入氨氮标准使用液（Vs ），加无氨纯水至标线，混匀 管号 1 2 3 4 5 6 /（mg/L） 0 0.40 0.80 1.20 2.00 水样 VS /mL 0 2.00 4.00 6.00 10.00 V水样 加入1.0mL酒石酸钾钠溶液 加入1.0 mL纳氏试剂 混匀 显色10 min 溶液呈黄色 420 nm处比色 实验注意事项 本方法只能用于较清洁的水样，污水需采用蒸馏发将氨分离收集后再加纳氏试剂比色 鱼池水常有色且浑浊，多数是由于水中生物或泥沙所造成，经Zn(OH)2 吸附处理后，一般可用此法测定 （五）结果计算与分析 二、亚硝酸态氮的测定Spectrophotometric method with sulphanilamide and coupling with N-(1-naphthyl)-ethylenediamine （一）实验目的 掌握水样预处理方法、亚硝酸氮的测定方法以及同一养殖水体中亚硝酸氮与氨氮和硝酸氮之间含量大小的关系。 （二）实验原理 在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色偶氮染料，该染料在波长543 nm附近有最大吸收。 （三）仪器与试材 仪器 分光光度计及配套比色皿 50mL具塞比色管 容量瓶 移液管 试剂 磺胺溶液 盐酸萘乙二胺溶液 亚硝酸盐氮贮备溶液 亚硝酸盐氮使用溶液 氢氧化铝悬浮液 2 mL氢氧化铝悬浮液 （四）主要操作步骤 样品预处理（凝聚法） 200 mL水样 中性滤纸过滤 于250 mL锥形瓶 弃去最初滤出的25 mL滤液 制作标准曲线及样品测定 取6支50 mL具塞比色管，分别按下表的量加入亚硝酸态氮标准使用液（Vs ），加无氨纯水至标线，混匀 管号 1 2 3 4 5 6 /（mg/L） 0 0.010 0.020 0.040 0.080 水样 VS /mL 0 0.50 1.00 2.00 4.00 V水样 混匀 分别加入1.0 mL磺胺溶液 分别加入1.0 mL 盐酸萘乙二胺溶液 混匀 显色15 min 543 nm处比色 溶液呈红色 （五）结果分析与计算 三、硝酸氮的测定-酚二磺酸比色法Determination of nitrate nitrogen -Spectrophotometric method with phenol disulfonic acid （一）实验目的 了解养殖水体硝酸盐的垂直分布特点 掌握硝酸盐测定的方法——酚二磺酸法 （二）实验原理 硝酸盐在无水情况下与酚二磺酸反应，生成黄色的硝基二磺酸酚，溶解后溶液在410nm处吸光度与硝酸氮的含量