Q_310113shxy101-2020有机益生菌菌剂.pdf

上海新溢生物科技工程研究中心企业标准 标准号： 有机益生菌菌剂 2019 年 12 月 25 日 制定 实施 上海新溢生物科技工程研究中心 前 言 1. 适用范围 本标准规定了有机益生菌菌剂的指标要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输 和贮存。 2. 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于 本标准。 《病原微生物实验室生物安全管理条例》 （国务院令2004第424号） 《人间传染的病原微生物名录》（中华人民共和国卫生部令2006第45号） 《动物病原微生物分类名录》（中华人民共和国农业部令2005第53号） GB 20287-2006 《农用微生物菌剂》 GB 2761-2017 《食品中真菌毒素限量》 GB 2762-2017 《食品中污染物限量》 GB 2763-2019 《食品中农药最大残留限量》 GB 29921-2013 《食品中致病菌限量》 GB/T 27861-201 《鱼类急性毒性试验》 HJ/T 415-2008 《环保用微生物菌剂环境安全评价导则》 NY 885-2004 《农用微生物产品标识要求》 3. 指标要求 3.1 外观要求 达到有机益生菌菌剂外观要求：澄清、透明、无异味；具有有机益生菌菌剂发酵特有 的气味。 3.2 技术指标 PH小于等于4.6。 在保质期内有活菌检出。 保质期：3个月 3.3 污染物指标 污染物符合GB 2762-2017 《食品中污染物限量》 真菌毒素限量符合GB 2761-2017 《食品中真菌毒素限量》 农药残留符合GB 2763-2019 《食品中农药最大残留限量》 致病菌限量符合GB 29921-2013 《食品中致病菌限量》 4. 试验方法 4.1 有效活菌数的测定 采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。 若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5 管法。 4.1.1 系列稀释 称取样品 10 g （精确到0.01 g），加入带玻璃珠的 100 mL 的无菌水中(液体菌剂取 l0.0 mL 加入 90 mL 的无菌水中)，静置 20 min，在旋转式摇床上 200 r/min 充分振荡 30 min，即成母液菌悬液（基础液）。 用无菌移液管分别吸取 5.0mL 上述母液菌悬液加入 45 mL 无菌水中，按 1:10进行系列 1 2 3 4 稀释，分别得到 1:1×10 ，1:1×10 ，1:1×10 ，1:1×10 ……稀释的菌悬液（每个稀释度 应更换无菌移液管）。 4.1.2 加样及培养 每个样品取 3 个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液 0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均 匀地涂于琼脂表面。 每一稀释度重复 3 次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。 4.1.3 菌落识别 根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜 检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。 4.1.4 菌落计数 以出现20~300 个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为 10~150 个菌落 数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度，其平均菌落数在 20～300 个之间时，则以该平均菌落数计算。若有两个稀释度，其平均菌落数均在 20～300 个之间 时，应按两者菌落总数之比值决定。若其比值小于等于 2 应计算两者的平均数；若大于 2 则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式（1）或式（2）计算： n = xkv /(m v ) ×10-8 ………………… （1） m 1 0 2 n = xkv /(v v ) ×10-8 ………………… （2） v