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论蔗糖合成甜味剂——三氯蔗糖的测定方法摘要:采用高效液相色谱法，Sugar-PakTM1色谱柱，以二次水为流动相，示差折光仪为检测器，外标法进行定量分析，测定三氯蔗糖含量，相对标准偏差为0.11(n=5)，线性相关系数为0.99990，最小检测浓度为0.2μg/mL。该方法准确、可靠且无毒，是测定三氯蔗糖含量的有效方法。 关键词:三氯蔗糖，高效液相色谱法，Sugar-PakTM1色谱柱 作者简介：王桂华，男，２８岁：研究生学历，在广州甘蔗糖业研究所工作，研究方向：糖品检测和标准化。 三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氯代而制得的一种非营养型强力甜味剂，其化学名4，1’，6’—三氯—4，1’，6’—三脱氧半乳型蔗糖。目前三氯蔗糖已广泛应用于饮料、口香糖、乳制品、蜜饯、糖浆、面包、糕点、冰淇淋、果酱、果冻、布丁等加工食品中。另外，三氯蔗糖是一种新型非营养性甜味剂[1，2]，是肥胖症、心血管病和糖尿病患者理想的食品添加剂，因此它在保健食品和医药中的应用不断扩大。我国卫生部在1997年颁发的《食品添加剂使用卫生标准》规定，可在饮料、酱菜、复合调味剂、配制酒、冰淇淋、糕点、水果罐头、饼干及面包中使用该产品，允许添加量为0.25g/kg，在改性口香糖、蜜饯中的添加量为1.5g/kg。　 由于目前食品添加剂三氯蔗糖含量的检测无标准或行业标准方法,相关的报导较少。我们用Waters高效液相色谱仪，以Sugar-PakTM1为色谱柱,水为流动相，示差折光检测器检测,外标法进行定量分析,建立了三氯蔗糖的含量测定方法,该方法简便，可靠且无毒，分离效果好,适用于生产过程及其应用厂家的监测。　 1实验部分 1.1仪器和试剂 Waters1525HPLC,Waters2414示差折光检测器,WatersEmpower色谱管理软件；二次水（0.45μm水相滤膜过滤），三氯蔗糖标样（美国SIGMA公司）。 1.2色谱条件 色谱柱：WatersSugar-PakTM1（6.5×300mm）；流动相：二次水（0.45μm水相滤膜过滤）；流速：0.5mL/min；进样量：10μL；柱温：90℃；检测器：2414示差折光检测器。 1.3标准溶液配制 准确称取约50mg的三氯蔗糖标准品于50ml容量瓶中，用二次水溶解并定容，所得溶液用0.45μm水相滤膜过滤，滤液备用，浓度为1000μg/mL。 1.4样品准备 分别称取样品1、样品2、样品3约1g的样品于3个25mL烧杯中,用二次水溶解，处理后移入50mL容量瓶中，并定容,试液用0.45μm水相膜过滤,滤液备用。 2结果 2.1色谱图 在上述色谱条件下，三氯蔗糖在色谱柱上的保留时间是11.79min。图1为三氯蔗糖标准样品的色谱图。 2.2工作曲线的绘制 精密配制三氯蔗糖系列标准溶液，其含量依次为5.0、10.0、15.0、20.0、40.0μg/mL。按上述色谱条件进行测定,以峰面积A对浓度C（μg/mL）作线性回归方程，相关系数R为0.99990（n=5），最小检测浓度为0.2μg/mL。 图1三氯蔗糖色谱图 2.3精密度试验 精确吸取样品1滤液5份，按上述色谱条件进行测定,三氯蔗糖测定结果的RSD为0.11。 2.4回收率试验 将样品（三氯蔗糖测定含量为50.80）配制成1μg/mL的溶液，分别与0.5μg/mL、1.0μg/mL、1.5μg/mL三氯蔗糖标准样品溶液，（各两份）等量混合后，在上述色谱条件下进行测定，结果如表一所示。 表一三氯蔗糖样品回收率试验 样品 原有量（mg） 加入量（mg） 加标后测得量（mg） 回收率（） 平均回收率（） 1 0.508 0.500 1.009 100.2 100.5 0.508 0.500 1.006 99.6 2 0.508 1.000 1.514 100.6 0.508 1.000 1.503 99.5 3 0.508 1.500 2.021 100.9 0.508 1.500 2.000 99.5 3讨论 结果表明，采用高效液相色谱法，用Sugar-PakTM1色谱柱， [NextPage] 以二次水为流动相，示差折光仪为检测器，外标法进行定量分析，测定三氯蔗糖含量，相对标准偏差为0.11(n=5)，线性相关系数为0.99990，最小检测浓度为0.2μg/mL。该方法简便、可靠且无毒，是测定三氯蔗糖含量的有效方法。