第十八章平面色谱法五版教材课程.pptVIP

; 第一节 平面色谱法的分类和原理;二、平面色谱法参数;2. 相对比移值（Rr）： 原点到样品斑点中心的距离 Rr = ——————————————— 原点到参考物质斑点中心的距离;第二节 薄层色谱法; 二、吸附薄层色谱法; 种类： 硅胶H：不含粘合剂，制板时需另加粘含剂。 硅胶G：硅胶和煅石膏混合而成。 硅胶HF254：不含粘结剂含剂,而含萤光剂，在 254 nm紫外光下呈强烈黄绿色荧光背景。 ; 2.氧化铝： 氧化铝G、氧化铝H、氧化铝HF254等;10;（二）展开剂 展开剂选择的一般原则: 相似相溶 ; 吸附剂和展开剂的选择;（一)薄层板的制备;1. 载板的准备： 要求：表面光滑、平整清洁。 2. 软板的制备： 直接将吸附剂置于玻板上并使成为一均匀薄层。 ;3.粘合薄层板（硬板）的铺制 (1) 粘合剂：煅石膏 羧甲基纤维素钠（CMC- Na） (2) 硬板的铺制方法： 薄层板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝，200～250目）均匀地涂在长条形玻璃板上（厚度0.15～0.5mm）。干燥后即可使用。;4. 活化: 硅胶板先晾干，再在 105 ～ 110?C 活化 0.5～1 小时。 冷却即可使用．也可保存于干燥器中备用。;（二）点样; 注意：? 点样线距底边1.5 ～2cm处。 ? 斑点面积越小越好。;（三）展开;注意： 点样线不能浸入展开剂中； 展开时要恒温、恒湿度； 展开槽和薄板须用展开剂蒸气饱和后再展开。 ;; （四）定位方法;2. 荧光法： 吸附剂中混有荧光剂，展开后，在紫外灯下，色斑在荧光背景上呈现暗斑。;（一）定性分析方法 定性分析的依据： 在固定的色谱条件下， 相同物质的Rf值 相同。 ;已知物对照法:样品与已知物对照品在同一薄层上展开，比较组分与对照品的Rf值。;（二）定量分析 1. 洗脱测定法： 斑点定位?斑点取下?洗脱?适当方法测定。 2. 直接测定法： 目视比较法: 比较样品斑点与对照品斑点的 颜色深度或面积大小 薄层扫描法: 测量斑点的面积大小。;六.薄层扫描法???介 以一定波长的光照射展开后的薄层色谱板，侧定其对光的吸受或所发出的荧光，进行定量分析的方法。;双波长薄层扫描仪光路示意图; 波长的选则： 测定波长：斑点中化合物的 ?max 参比波长：斑点中化合物无吸收的波长 目的：消除背景吸收;图19-2 薄层色谱扫描曲线; 测光方式 a. 透射法： 只适用于透明薄板。 b. 反射法：;32; 外标两点法： m样 = a + b A样 b = (m1 - m2) / (A1- A2) a = m1 - b A1;七、薄层色谱法的应用 合成药物反应速度或反应完成程度的监控； 药物的杂质检查； 天然药物有效成分的分离、鉴定、含量测定； 少量物质的制备、提纯等。 ; 判断合成反应进行的程度： 例：判断普鲁卡因合成反应的终点。 色谱条件： 固定相：硅胶-CMC 展开剂：环己烷-苯-二乙胺 ( 8:2:0.4 ) 显色剂：碘化铋钾; 1 2 3 4 5;第三节 纸色谱法; 定性参数：Rf 值：同薄层色谱 影响Rf值的因素： 1. 组分的性质：组分的极性强，Rf值小。 2. 色谱条件 展开剂的极性 展开剂的蒸气 展开时的温度; CHO CHO CHO HC-OH OH-CH CH2 HO-CH OH-CH HC-OH HC-OH