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- 2020-06-07 发布于江苏
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第三章 分子生物学常用
技术和基本原理
第一节 分子生物学常用工具酶
一、限制性核酸内切酶与DNA分子的体外切割
1
、来源与作用:是原核生物中的一类防御武器,可
以将外源性DNA分子切割成大小不同的片断,而细
菌本身的DNA由于修饰酶(通常为甲基化酶)的保
护作用,免受降解。与甲基化酶共同构成细菌的限
制修饰系统,限制外源DNA, 保护自身DNA。1970
年首先在流感嗜血杆菌中发现Hi nd Ⅲ 。
2、定义:
2、命名:
3、分类:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
(基因工程技术中常用Ⅱ型)
4 II
、 型限制酶的特点
Ⅱ类酶识别序列特点—— 回文结构(palindrome)
GGATCC
CCTAGG
切口 :平端切口、粘端切口
HindⅡ Bam HⅠ
GTCGAC
CAGCTG
GGATCC
CCTAGG
GTC
CAG
+
GAC
CTG
G
+
CCTAG
GATCC
G
平端切口 粘端切口
同功异源酶
来源不同的限制酶,但能识别和切割
同一位点,这些酶称同功异源酶。
Bam HⅠ
GGATCC
CCTAGG
G
CCTAG
GATCC
+
G
BstⅠ
GGATCC
CCTAGG
G +
CCTAG
GATCC
G
同尾酶
有些限制性内切酶虽然识别序列不完全
相同,但切割DNA后,产生相同的粘性末
端,称为同尾酶。这两个相同的粘性末端称 为配伍未端(compatibl
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