缓冲溶液之pH值对以含铜赤血盐修饰电极侦测过氧化氢的.pptVIP

* 緩衝溶液之pH值對以含銅赤血鹽修飾電極偵測過氧化氫的靈敏度之影響 The Effect of the pH of Buffer Solution on the Sensitivity of Detection of Hydrogen Peroxide for the Electrode Modified with Copper Hexacyanoferrate 蕭佳政、林庭立、林浩 南台科技大學化學工程與材料工程系 摘要 此研究中採用含銅赤血鹽來修飾碳糊電極。葡萄糖與氧氣經酵素催化生成葡萄糖酸及過氧化氫，故本研究欲利用還原反應所產生之電流以偵測過氧化氫進而檢測葡萄糖含量，其偵測原理（示於圖一）即利用電極表面於固定之還原電位下釋出電子，將電子傳媒(mediator)變成還原態;再藉由電子傳媒之還原態釋出電子催化還原H2O2成H2O，而電子傳媒將由還原態變成氧化態；利用所得之電流訊號之大小，即可計算出過氧化氫的含量，進而推算葡萄糖之濃度，故過氧化氫之偵測技術為一重要的研究主題。由於碳糊電極之製作方式較簡便，且有利於製成網印電極，故本究 究進行碳糊電極之製備。本研究以含銅赤血鹽與碳粉之比例為3 : 7製成之碳糊電極為工作電極，Ag／AgCl作為參考電極，圈繞之Pt絲作為輔助電極，所構成之三電極系統，連接電化學分析儀（CHI401A），在操作電位-200mV ，通氮除氧15分鐘後，在溫度30 ± 0.2 ℃下，並在固定攪拌速率(500rpm)下，以Time-Base(TB)模式，每100秒注入10 μL 100 mM H2O2 ，檢測在不同pH值之PBS緩衝溶液中偵測過氧化氫之應答電流[ (A) pH = 4.0 (B) pH = 5.0 (C) pH= 6.0 (D) pH= 7.4 (E) pH= 8.0 ] 。 過氧化氫感測器與葡萄糖感測器均為重要之研究主題，含銅赤血鹽本身具有強催化性能，與具有導電性能的碳粉及碳漿製作成碳糊電極，藉以提升過氧化氫之應答電流，在磷酸鹽緩衝溶液中偵測過氧化氫之應答電流，計算過氧化氫之濃度，而葡萄糖藉由葡萄糖氧化酵素的催化，可產生葡萄糖酸和過氧化氫，故可藉以推算葡萄糖之濃度。本研究運用共沉法製備含銅赤血鹽粉體[含銅赤血鹽：碳粉=3：7(重量比)]，並運用含銅赤血鹽來修飾碳糊電極，藉以提升催化還原過氧化氫之應答電流。在30℃，操作電位為-200mV ，攪拌速率為500rpm，以0.05 M磷酸鹽緩衝溶液偵測過氧化氫之應答電流，當pH值為4.0，5.0，6.0，7.4，8.0時，靈敏度分別為152.124 μA / cm2 ?mM H2O2，147.403 μA / cm2 ?mM H2O2，140.347 μA / cm2 ?mM H2O2，136.658μA / cm2 ?mM H2O2，80.141 μA / cm2 ?mM H2O2 。結果顯示pH值為4.0之靈敏度最高而人體血液之pH值約為7.4。故本研究進而實施碳糊電極在pH=4.0 與pH=7.4之磷酸鹽緩衝溶液之偵測極限與線性範圍之測試。在操作電位-200mV，攪拌速率500rpm，以0.05mM磷酸鹽緩衝溶液(pH=4.0)偵測過氧化氫之應答電流，可得偵測極限為0.02 mM H2O2，線性範圍為 0.02~2.8 mM H2O2， R2=0.9982，靈敏度為141.04μA/cm2?mM H2O2 ，平均應答電流為2.270μA 。在操作電位-200mV，攪拌速率500rpm，以0.05mM磷酸鹽緩衝溶液(pH=7.4)偵測過氧化氫之應答電流，可得偵測極限為0.02 mM H2O2，線性範圍為 0.02~2.6 mM H2O2， R2=0.9945 ，靈敏度為121.606 μA/cm2?mM H2O2 ，平均應答電流為1.958μA 。 圖一 葡萄糖酵素電極之偵測原理 CuSO4 ． 5H2O(aq) (MERCK） 3(CuSO4．5H2O)+2〔K3[Fe(CN)6 〕 Cu3[Fe(CN)6]2 +3K2SO4 +15H2O 共沉法： K3Fe(CN)6(aq)（MERCK） Cu3[Fe(CN)6]2 (aq) 分離副產物 乾燥60℃ (48小時) 含銅赤血鹽粉體 化學計量 3 ： 2 莫耳比(mole ratio) 前言 實驗方法 結果與討論 圖二 經含銅赤血鹽修飾與未經修飾的碳糊電極之CV圖 [於5 mL 含 0.1 M KCl 之0.05 M PBS 中， pH = 7.4 (A) 為含銅赤血鹽修飾(均質機攪拌)之碳糊電極 (B)為含銅赤血鹽修飾(磁石攪拌)之碳糊電極 (C)為未經修飾之碳糊電極，掃描速率為50 mV/s