动物模型谢强敏知识分享.ppt

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3. 胆管囊肿动物模型(animal model of bile ductcyst) 胆管囊肿的基本发病环节有: ① 病变处部分或全部管壁薄弱,可能因胚胎发育的异常或感染,外伤或胰管系结构异常所致胰液逆流而引起,或者是新生期病变部发育不全; ② 在存在或不存在病变部位远侧胆道梗阻情况下,肝胆汁分泌与胆囊胆汁排泄所致胆道内压的增高。胆道梗阻亦可因不同的先天性或获得性病因而引起。 采用绵羊或山羊(出生后14d内),雌雄不拘,具体方法为: (1) 胆总管远端结扎术 戊巴比妥钠(1.5~4mg/kg体重)腹腔内注射麻醉,显露肝门部,在胆总管与近侧小肠段汇接点的上方(一般距幽门约4~5cm),用1号丝线将胆总管全周缝扎,造成胆总管完全梗阻,关腹。 (2) 胆总管置管胆囊结扎术 麻醉、手术显露方法同前。用1号丝线近肝总管处全周缝扎胆囊管,再将胆总管前壁纵行切开,在胆总管内置人一硅胶管,内径0.1cm,长约3.0cm,在硅胶管两端约0.5cm处,分别用1号丝线全周缝扎肝总管和胆总管,使置入之硅胶管固定在胆管内,造成胆总管不全性梗阻。 ① 对初生体弱动物,需要输液,可在关腹前腹腔内置人热生理盐水; ② 术后麻醉清醒前注意保温,防止肺部感染; ③ 注意勿进食过早,以免导致扩张,视动物状况,可以喂水、糖或奶粉,2~3d后再辅以青饲料。 术后胆道造影或直接观察见胆管节段性扩张,宽度达邻近胆管3倍或3倍以上,或直接见胆囊憩室,即为复制成功。 注意事项 该模型可应用于 ① 为胆管囊肿病发病学研究从实验上提供依据; ② 研究远侧胆道梗阻后梗阻性黄疽的近期发展与后果,以及分析其死亡原因; ③ 不全梗阻可使动物在较长时期内成活,这种较长期存活的胆汁淤滞的胆道扩张模型,可以于探索胆石成因之间的关系及结石生成的规律,也可对扩张胆道上皮增殖和诱发肿瘤的可能性进行观察。 6.肝癌(carcinoma of the liver) (1) 二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌模型 0.25%DEN水溶液灌胃(按10mg/kg体重),每周剩余6d用0.025%DEN水溶液让其自由饮用。共约4个月即可诱发出肝癌,5~6个月诱癌率达80%以上。亦可用0.005%DEN的饮水喂养8个月诱发。 (2) 4-二甲基氨基偶氮苯(DAB)诱发大鼠肝癌模型 使用含有0.06%DAB的饲料喂养大鼠,同时控制饲料中维生素B2含量(不超过1.5~2mg/kg体重)。经4~6个月可诱发成功。 (3) 2-乙酰氨基芴(2AAF)诱发动物肝癌 给成年大鼠含0.03%2AAF标准饲料,每日每只2~3mg2AAF,经3~4个月即可诱发成功。此方法也可用于诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔等动物肝癌。 (4) 亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌 用1%OAAT苯溶液涂于动物两肩胛间皮肤上,隔日1次,每次2~3滴,一般涂100次。7个月以上诱发肝肿瘤率55%。亦可用2.5mgOAAT溶于葵花籽油中,皮下注射C3H小鼠,每10天一次。 (5) 黄曲霉素诱发大鼠肝癌 在大鼠饲料中加入黄曲霉素,含0.011~0.015mg/kg,喂养6个月,诱发率达80%。 (6) 二甲氨诱发肝癌模型 将二甲氨用食用菜油配制成3%的溶液,按98g精白碎米加2ml 3%二甲氨溶液的比例配制饲料(相当于每克碎米含0.06mg二甲氨),喂养雄性大白鼠(体重150~200g)4~6周,停药1周(以精白碎米代替),后改用基础饲料加0.12%二甲氨继续喂养12~13周,即可诱发出肝癌。 (7) 黄曲霉素B2诱发麻鸭肝癌模型 采用半月龄雏鸭,自由食取肝癌高发区启东霉玉米配合饲料(内含黄曲霉素B1),同时饮高发区浅井水,直至动物自然死亡,可见麻鸭发生肝细胞癌。 7.脑肿瘤(brain tumor) (1) 乙基亚硝基脲(ENU)诱发大鼠胶质瘤 用0.5%~1%ENU按60mg/kg体重给药于Wistar大鼠。给药途径有两种,即经孕鼠胎盘给药致其子代鼠成瘤和经新生幼鼠皮下给药致瘤。前者是选用正常妊娠的健康Wistar大鼠(体重340g左右),在妊娠晚期(距预产期前7天)经尾静脉一次性缓慢注射1%ENU溶液;后者是选用3日龄健康Wistar大鼠(体重约4g),于肩胛部或腰骶部一次性皮下注射0.5%ENU溶液。观察12个月,诱发出脑、脊髓胶质瘤。用此方法诱发的胶质瘤在组织学上以混合性少突星形细胞瘤为主,偶伴发肾纤维肉

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