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PCR引物设计流程详解 本文目的：复制出 IL-4 基因片段 一、 查找基因序列 进入 NCBI主页，下拉选框选择 Nucleotide ，在搜索栏输入要查找的目的基因， 即 IL-4，点击搜索 2 、在搜索结果选择灵长类（ Homo sapiens） 在灵长类 IL-4 基因中选择需要的 mRNA序列 查看基因的相关信息 外显子区域 CDs区域 点击 FASTA格式，并将序列保存到文档 使用 primer premier 设计引物 建立新文件，将所得的序列复制进输入框内 点击搜索按钮，搜索引物 设置引物设计参数（因为在之前查找基因序列的时候获知，外显子区域分别为： 1-200、201-248、249-425、426-618，又知在引物设计时引物位置最好跨越一个 内含子，PCR产物长度通常为 100-150bp，故设定上游引物位置为 201-248，下游 引物位置为 249-425，产物长度为 100-150bp） 4 、确认条件后，显示搜