谷氨酸的生产工艺 文档资料.ppt

第 20 页，共 69 页 谷氨酸发酵的碳氮比为 100 ： (15~21) ，当碳氮 比为 100 ： 11 时才开始积累 Glu 。目前生产 L- Glu 多采用尿素作为氮源 ，进行分批流加，流加 时温度不易过高（不超过 45 ℃），否则游离氨 过多，使初始 pH 值过高，抑制菌体生长； 适量的 NH 4+ 可减少 a- 酮戊二酸的积累，促进 Glu 的合成； 过量的 NH 4+ 会使生成的谷氨酸受谷氨酰胺合成 酶的作用转化为谷氨酰胺。 第 21 页，共 69 页 无机盐 磷酸盐 在谷氨酸发酵中非常重要，它是谷氨酸发 酵过程中必需的，但浓度要适中。 浓度过高，抑制 6- 磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，菌 体生长好， Glu 产量低，代谢转向 Val 发酵； 浓度低，糖代谢受抑制，糖耗慢。 K + ：多时 —— 利于产酸，少时 —— 利于长菌 ; Mn 2+ ：草酰琥珀酸脱羧生成 a- 酮戊二酸是在 Mn 2+ 存在下完成的（ MnSO 4 4H 2 O 2ppm ）； Fe 3+ : 促进 Glu 产生； Cu 2+ ：毒害作用。 第 22 页，共 69 页 生长因子 “ 亚适量 ” 的生物素（ 2ug/L~5ug/L ）； 实际生产中常通过筋加玉米桨、麸皮水解液、 糖蜜等作为生长因子的来源，来满足谷氨酸 生产菌必需的生长出子。 第 23 页，共 69 页 生物素对谷氨酸发酵的影响 生物素 作为催化 脂肪酸生物合成 最初反应的关键 酶 —— 乙酰 CoA 羧化酶的辅酶 ，参与了脂肪酸的生 物合成，进而影响磷脂的合成。当控制生物素在亚 适量时，脂肪酸合成就不完全，导致磷脂合成不完 全。而细胞膜是由磷脂双分子层组成的，当磷脂含 量减少到正常时的一半左右时，细胞发生变形，谷 氨酸能够从胞内渗出、积累于发酵液中。如果生物 素过量，则发酵过程菌体大量繁殖，不产或少产谷 氨酸，代谢产物中乳酸和琥珀酸明显增多。 五 发酵过程和控制 谷氨酸生产菌经活化、一级种子、 二级种 子扩大培养，接入发酵罐中，在 32 ℃ ~38 ℃、 pH 7.0 左右的条件下，好氧发酵 30h 左右； 第 24 页，共 69 页 第 25 页，共 69 页 接种龄和接种量 一般情况，一级种子种龄控制在 11h~12h ， 二级种子种龄控制在 7h~8h 。 一般接种量为 0.6%~1.7% 。 第 26 页，共 69 页 温度 前期（菌体生长） 30 ℃ ~32 ℃； 后期（ Glu 合成） 34 ℃ ~37 ℃； 前期：如果温度过高、菌种易衰老，严重影响菌 体生长繁殖。如遇此情况，除维持最适生长温度 外还需适当减少风量，并采取少量多次流加尿素 等措施； 在发酵后期，菌体生长基本结束，为了满足大量 生成谷氨酸，可适当提高温度，控制在 34 ℃ ~37 ℃。 第 27 页，共 69 页 发酵前期 pH 值 发酵前期： 由于幼龄细胞对 pH 较敏感，如果控制 pH 过 低，菌体生长旺盛，营养成分消耗大，转入 正常发酵慢，长菌不产酸；如果 pH 值过高， 虽然有利于抑制杂菌生长，但对菌体生长不 利，糖代谢缓慢，发酵时间延长。 发酵前期，菌体生长的适宜 pH 值为 7.5 左右。 第 28 页，共 69 页 发酵后期 pH 值 发酵后期： 由于谷氨酸脱氢酶最适 pH 为 7.0~7.2 ，转氨酶最 适 pH7.2~7.4 ，所以在发酵中后期，为了促进谷 氨酸的生成，应尽可能保持发酵液 pH7.2 左右。 pH 过高 (pH7.5~8.0) ：谷氨酸就有可能转变成 谷氨酰胺，且易使菌体自溶； pH 过低 (pH7.0 以下 ) ： NH 4+ 供应不足， a- 酮戊 二酸不能还原氨基化产生谷氨酸，这样就会使 发酵液 a- 酮戊二酸量增加，谷氨酸产量降低。 第 30 页，共 69 页 pH 值控制 尿素流加法； 氨水流加法； 流加尿素数量和时间的依据： pH 值变化、菌体生 长、糖耗、发酵阶段。 发酵前期： 菌体生长和糖耗均快时：多流加尿素 —— pH 值 高 —— 抑制生长； 菌体生长和糖耗均慢时：少流加尿素。 第 31 页，共 69 页