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第二节 基因工程的原理和技术
[ 随堂检测 ]
1.下列关于基因工程技术的叙述,正确的是 ( )
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别 6 个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了 DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
解析:选 D。A 项,限制性核酸内切酶大多特异性地识别 6 个核苷酸序列,但也有少数
限制性核酸内切酶能识别 4 个、 5 个或 8 个核苷酸序列。 B 项, PCR反应中温度周期性变化
是为变性、 复性和延伸创造条件。 另外,耐高温的 DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用,
变性和复性过程不需要酶的催化。 C 项,载体质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因,供
重组 DNA的鉴定和选择,而不是抗生素合成基因。 D 项,目的基因导入受体细胞后不一定能
正常表达。
2.将 ada( 腺苷酸脱氨酶基因 ) 通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
下列叙述错误的是 ( )
A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 ada
D.每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
解析:选 C。大肠杆菌成功表达出腺苷酸脱氨酶,说明这些大肠杆菌都至少含有一个重
组质粒, A 项正确;作为载体的条件为至少含有一个或多个酶切位点,所以作为载体的质粒
至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点, B 项正确;作为基因表达载体应包括目的基因、
启动子、终止子、标记基因四部分, 但并不是每个酶切位点都至少插入一个 ada ,C 项错误;
由于这些目的基因成功表达,所以每个 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子, D项正确。
3.天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B,而开蓝色花的
矮牵牛中存在序列已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是 ( )
A.提取矮牵牛蓝色花的 mRNA,经逆转录获得互补的 DNA,再扩增基因 B
B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 B
C.利用 DNA聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞
D.将基因 B 直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞
解析:选 A。提取矮牵牛蓝色花的 mRNA,逆转录得到 DNA,然后扩增,可获得大量的基
因 B,A 正确;从基因文库中获取目的基因,只要根据目的基因的相关信息和基因文库中的
信息进行筛选对比即可,不需要用限制酶进行切割, B 错误;目的基因与质粒的连接需要用
1
DNA连接酶, 而不是 DNA聚合酶, C 错误; 目的基因需要和载体连接后形成重组质粒再导入,
而且应该用农杆菌进行感染,而不是大肠杆菌, D错误。
4 .如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其
中 Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的
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