分子生物学--原核生物基因表达调控课件电子教案.ppt

原核生物基因表达的调控;主要内容;一、概述;（二）基因的可调控性;Definition: 又称管家基因(housekeeping genes) 是维持细胞生存必需的一类基因， 在各类细胞中都处于活性状态。 ;调控型基因(regulated genes);;结构基因(structural genes):编码有功能产物（RNA或蛋白质）的基因。 调控基因(regulatory genes):编码那些控制其他基因表达的RNA或蛋白质的基因。;;调控蛋白;正调控(positive regulation):与缺乏调控因子比较，调控因子使靶基因的表达水平上升。 负调控(negative regulation):调控因子使靶基因的表达水平下降，甚至关闭。;???导(induction):在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可诱导的. 阻遏(repression):如果基因对环境信号应答时被抑制，基因表达产物水平降低.;（六）效应物;诱导物 (inducer);去阻遏作用;（七）原核生物基因表达的控制模式;阻遏;阻遏;1961年 Monod和Jacob提出操纵子学说 1965年诺贝尔生理学和医学奖;1940年， Monod发现：E.coli在含葡萄糖和乳糖的培养基上生长时， 细菌先利用葡萄糖，葡萄糖耗尽后，才利用乳糖； 在糖源转变期，细菌的生长会出现停顿，即产生“二次生长曲线”。 ;乳糖对?－半乳糖苷酶的合成有诱导作用。 葡萄糖对?－半乳糖苷酶的合成有抑制作用。;1961年，操纵子学说 由Jacob和Monod提出 1965年 诺贝尔生理学和医学奖;原核生物基因表达、调控的基本形式； 由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。 操纵基因受调控基因产物的控制。;二、乳糖操纵子(lac operon);Z;;Z;Z;;安慰诱导物 gratuitous inducer：能高效诱导酶的合成但不被所诱导的酶分解的分子。 如：IPTG（异丙基硫代半乳糖苷） ;1.操纵基因lacO的结构; lacO是-5至+21的序列，与启动子右末端重叠;lacO的序列，以+11为对称轴具有反向重复序列;;2.阻遏蛋白（repressor）;阻遏蛋白是由相同亚基组成的同源四聚体(tetramer);;;;;3.阻遏蛋白与诱导物的作用;诱导物作用的两种模型;解离模型：;Virtually all the repressor in the cell is bound to DNA;LacZ突变： β半乳糖苷酶基因的突变，因而不能分解利用乳糖 lacY 突变： β半乳糖透性酶基因的突变，不能从培养基中吸收乳糖;操纵基因lacO的突变;调控基因的突变;lacI突变成为lacI;使阻遏蛋白对诱导物不起反应。 因为阻遏蛋白失去了结合诱导物的位点，或它不能将其作用传递给DNA 结合位点。;通过突变确认并绘制LacI 基因内不同的功能区;;（四）lac操纵子的正调控;ATP cAMP;;1.分解代谢阻遏作用;Active CAP;;分解代谢阻遏作用（catabolite repression）： 在细胞中，优先利用葡萄糖作碳源，而不使用其他糖类这种选择，是由葡萄糖的分解代谢物控制的。;;;2.CAP的作用位点;CAP蛋白是二聚体 CAP 结合的共有序列有2个保守的5 碱基序列TGTGA;3.CAP的作用机制;CAP-cAMP激活作用的模型;促进RNA聚合酶对-35和-10序列的识别和结合，有利于形成开放型起始复合物;;CAP存在原因;5.lac操纵子正负调控的协调作用;无乳糖:阻遏蛋白结合于操纵基因，转录不能起始。;三、色氨酸操纵子(trp operon);（一） trp operon的结构;;（二） trp operon的负调控;trpR;trpR;（三） trp operon的衰减作用;Definition: 衰减子又称弱化子(attenuator) DNA中可导致转录过早终止 的一段核苷酸序列;前导序列特点;3区;由1区和2区还可构成第二个发夹结构;2区也可与3区互补, 就会阻止3区和4区形成发夹结构,即不形成终止信号;衰减作用机制;Translation of Trp leader RNA:; trp存在时，核糖体能合成前导肽，核糖体伸展到2区，阻碍1区和2区配对，结果3区同4区配对形成终止子结构，RNA合成终止.; 没有trp时，核糖体在1区的trp密码子停留较长时间，阻碍1区和2区配对，2区同3区配对，4区不能形成终止子, RNA继续合成.;Gly饥俄时，核糖体停在GGU上，1区和2区