分子生物学--蛋白质的生物合成课件讲义教材.ppt

Protein Biosynthesis蛋白质的生物合成;概述 遗传密码 tRNA 核糖体 蛋白质的生物合成过程 一般特征 原核生物 真核生物 蛋白质的运输和翻译后修饰;二、蛋白质的生物合成过程;（二）蛋白质生物合成的过程;核糖体解离;氨基酸活化;氨基酸 ＋ATP—→ 氨基酰-AMP＋ PPi ;第二步：;氨酰-tRNA合成酶将氨基酸装载到tRNA上的过程;氨酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet;E.coli蛋白质的生物合成过程;肽链起始(Initiation) 肽链延伸(Elongation) 肽链终止(Termination);起始密码子多数是AUG，少数是GUG。 SD序列：起始密码子的上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列。 SD序列与核糖体16S rRNA 3’端的核苷酸序列互补，可促使核糖体与mRNA的结合。 ;;2.起始tRNA;;（1）tRNAf Met 带上Met后能甲酰化，是起始tRNA，用于肽链合成的起始。 （2）tRNAmMet带上Met后不能甲酰化，在肽链延伸中起作用。;The structure of fMet-tRNAf;3.原核生物翻译起始因子;inactive 70S ribosome;70S initiation complex;肽链的延伸;1.进位：;延长因子EFTu和EFTs催化进位;;2.成键：;;3.移位;进位;;肽链的终止和释放;;2. 肽链释放：释放因子使肽酰转移酶活性转变为水解活性，并释放tRNA，然后核糖体离开。;;1. 核糖体：更大，80S，可解离成60S和40S。 2. 起始tRNA：;3.起始密码子：;;命名为eIF-n eIF-3：与40S亚基结合，使大小亚基解离； eIF-2：与Met-tRNAiMet及GTP结合； eIF-4：与mRNA的帽子结合。 eIF-5：释放起始因子，使核糖体亚基结合;1. 80S核糖体解离;3.形成40S前起始复合物; 复合物对mRNA进行滑动搜索，寻找起始密码子AUG;;原核生物和真核生物翻译起始的比较;5．延伸因子和终止因子：;;蛋白质合成总结;终止密码子 eRF GTP;三、蛋白质的运输和翻译后修饰 ;（一）概述;;What determine proteins’ fates ?;;（二）共翻译转运 (Co-translational transport);1.蛋白质进入内质网;信号肽（signal sequence）;信号肽的一级结构;;信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 ;信号肽的切除 二硫键的形成 高级结构的折叠 糖基化作用;2.蛋白质从ER到高尔基体及内膜其他区室的转运;;多数由游离核糖体合成 翻译后运输（post-translational transport） 蛋白含有前导序列（leader sequences）与定位有关 进入线粒体和叶绿体前先解折叠, 进入后重新折叠, 需要分子伴侣; 蛋白质跨膜前需解折叠，跨膜后重新折叠成熟的构型;前导序列(Leader sequences);前导序列介导翻译后的跨膜转运;酵母细胞色素C 氧化酶IV 亚单位的前导序列 开头的12 个氨基酸足以将多肽链导入线粒体的基质中去。; Tom (trans-outer membrane，外膜转运受体蛋白) 形成受体复合物; Tim(trans-inner membrane，内膜转运受体蛋白) 形成受体复合物。; 当蛋白质通过Tom复合物时，暴露于膜间腔。并不被释放而是直接转运到Tim 复合物上。;Recognition Passing through Cleavage（剪切）;前导序列决定蛋白在细胞器中的定位;Leader of yeast cytochrome c1 contains a mitochondrion signal, followed by an inner membrane signal. The leader is removed by two cleavage events.;;叶绿体蛋白跨膜运输方式与线粒体相同;（四）蛋白质通过核孔进入细胞核;核定位信号（nuclear location signal, NLS）指引蛋白质从胞质到核内的信号序列。 NLS富含碱性aa;蛋白转运需要胞质中的蛋白作核定位的受体;本章总结;名词解释（※） ：遗传密码（genetic code）、 SD序列、信号肽（signal sequence）、核定位信号（NLS） 遗传密码的基本特点 比较mRNA、tRNA、rRNA的结构及功能（※） 原核生物蛋白质合