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                细菌学检查标本采集技术操作规范
一、刮片法采集细菌学检查标本
    【适应证】
    1.怀疑细菌性结膜炎。
    2.怀疑细菌性角膜炎。
    3.怀疑眼睑及睑缘等处皮肤有细菌感染导致的炎症。
    【禁忌证】
    因精神因素或全身情况不适合检查者,角膜溃疡已经有穿孔倾向者。
    【操作方法及程序】
    1.眼睑及睑缘等处皮肤病变区的刮片方法。
    (1)若病变区处分泌物多时,可先用灭菌生理盐水湿棉签将分泌物沾去,或用生理盐水冲洗,把表面分泌物去除干净。
    (2)刮刀刮取标本。
    2.结膜组织刮片方法。
    (1)刮去前,先滴表面麻醉药如0.5%丁卡因眼水,对结膜进行表面麻醉。
    (2)若结膜病变处分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
    (3)翻转眼睑暴露睑结膜。
    (4)左手固定睑结膜,右手持灭菌刮匙。
    (5)根据病变情况和检查需要,选择刮取部位并刮取标本。
(6)刮取标本后,滴用抗菌药物滴眼液。
    3.角膜组织刮片方法。
    (1)结膜囊滴用表面麻醉药,进行表面麻醉。
    (2)若病变处分泌物多时,可先用灭菌生理盐水湿棉签将分泌物沽去。
    (3)用手指将睑裂开大,轻压眼球使其固定,或用开睑器撑开眼睑,以镊子或棉签固定眼球。
    (4)选角膜溃疡的进行缘或基底部刮取标本。
    (5)刮取标本后,滴抗菌药物滴眼液。
    4.将刮取标本涂片、固定、染色后,在显微镜下观察结果并记录。
    【注意事项】
    1.用刮匙刮取标本应使刮刀与组织表面垂直,刮取时动作要轻柔准确。
    2.在病变组织的同一部位不要反复刮取。
    3.若需刮取角膜溃疡基底组织时,勿过度向下用力,以防造成角膜孔。
    4.尽量在发病初期,使用抗菌药物之前刮取标本,以提高阳性检出率。
    5.根据细菌种类不同选择固定和染色的方法。
    6.采集标本时,注意无菌操作。
    7.标本量少时易于干燥,应及时固定后立刻送检,送检中应避免污染。
二、拭子涂抹法采集细菌学检查标本
    【适应证】
    1.怀疑细菌性结膜炎。
    2.怀疑细菌性角膜炎。
    3.怀疑眼睑及睑缘等处皮肤有细菌感染。
    4.怀疑泪道的细菌感染。
    5.内眼手术前结膜囊细菌培养。
    【禁忌证】
    1.因精神因素或全身情况不适合检查者。
    2.角膜溃疡已经有穿孔倾向者。
    【操作方法及程序】
    1.眼睑及睑缘等处皮肤病变区的涂抹法采集标本。
    (1)若损害处浮游性分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将浮游性分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
    (2)然后用无菌试子往返擦拭病变组织表面采集标本。
    2.结膜组织涂抹法采集标本。
    (1)先滴用表面麻醉药,对结膜进行表面麻醉。
    (2)若结膜病变处浮游性分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将浮游性分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
    (3)翻转眼睑暴露睑结膜。
    (4)左手固定睑结膜,右手持灭菌拭子,用拭子自一端向另端水平方向涂拭穹隆部结膜;旋转拭子的另一面与结膜接触,往返再涂擦1次。
    (5)采集标本后,滴用抗菌药物滴眼液。
    3.角膜组织涂抹法采集标本。
    (1)采集前,滴用表面麻醉药,进行表面麻醉。
    (2)用手指将睑裂开大,轻压眼球使其固定,或用开睑器撑开眼睑,以镊子固定眼球。
    (3)用灭菌拭子轻轻捻转涂拭溃疡基底部和溃疡进行的边缘。
    (4)标本采集后,滴抗菌药物滴眼液。
    4.泪道标本的涂抹法采集。
    (1)采集泪囊标本时,用手分开近内毗上下眼睑,压挤泪囊区,使囊内容物流进人结膜囊,再用灭菌拭子采集结膜囊标本。
    (2)采集泪小管标本时,先局部行表面麻醉,而后将一拭子放置在泪小管区后方,压迫泪小管皮肤面,用另一拭子擦取泪小点处泪小管反流物。
    5.将采集的标本涂片、固定、染色后,在显微镜下观察结果并记录。
    【注意事项】
1.选用涂抹法采集标本进行细菌培养时,应同时做药敏实验。
2.根据细菌种类不同选择固定和染色方法。
3.采集标本的器械注意消毒处理,应注意无菌操作。
4.涂片不可过厚,以免影响显微镜检查。
穿刺法采集眼部细菌学检查标本
【适应证】
怀疑眼内细菌性感染者。
【禁忌证】
1.因精神因素或全身情况不适合检查者。
2.有明显出血倾向者。
【操作方法及程序】
1.前房水采集法。
(1)结膜囊滴用表面麻醉药。
(2)生理盐水冲洗结膜囊。
    (3)用开睑器撑开眼睑。
    (4)在手术显微镜下,用1ml一次性注射器针头,在角膜缘部穿刺进入
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