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专题 2.2 动物细胞工程 齐河一中 王英 从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然 后，放在适宜的培养基中，让 这些细胞生长和增殖。 原理：细胞增殖 动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官 细胞悬浮液 10 代细胞 50 代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 （分解弹性纤维） 原代培养 胰蛋白酶 剪碎 细胞株 细胞系 动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。 遗传物质 未改变 遗传物质 已改变 接触抑制 细胞株： 原代细胞一般传至 10 代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到 40~50 代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系： 细胞株传代至 50 代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。 原代培养： 将动物组织消化后的初次培养 称为原代培养。 传代培养： 用胰蛋白酶将出现接触抑制 的贴壁细胞从培养瓶壁上脱离下来，制 成细胞悬液，分装到多个培养瓶中继续 培养，这个过程叫传代培养。 上述过程中，在第一培养瓶中培养到 接触抑制就是原代培养，之后转移到其 它培养瓶中培养就是传代培养 细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数 量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相 互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 1 、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2 、营养 （ 葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血 浆等、维生素。 ） 3 、温度和 PH 36.5 +0.5 度 ； PH 为 7.2-7.4 。 4 、气体环境： O 2 和 CO 2 （ 95% 空气和 5% CO 2 ） 补充合成培养基 中缺乏的物质 ? （ 1 ）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体等。 ? （ 2 ）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 ? （ 3 ）用于检测有毒物质 ? （ 4 ）用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据 2 、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 1 、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？ 3 、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 4 、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成 新个体？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有： 1 、液体培养基 2 、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4 、细胞膜的主要成份是什么？ 5 、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 6 、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物 组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 思考题 3 、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细 胞间的物质是什么成份？ 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体或组织 培养结果 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育 无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 动物核移植： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并 发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终 发育为动物个体。 用核移植的方法得到的动物。 克隆动物： 类型 ：胚胎细胞核移植和体细胞核移植