专项2 课题3 分解纤维素的微生物的分离.ppt

课题 3 分解纤维素的微生物的分离 [ 自读教材 · 夯基础 ] 1 ． 纤维素 (1) 基本组成单位： 。 (2) 含量：是地球上最丰富的 类物质。 (3) 分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产 物。此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 葡萄糖 多糖 棉花 纤维素酶及纤维素分解菌的筛选 2 ． 纤维素酶 (1) 组成：纤维素酶是一种 ，至少包括三种 组分，即 、 和 。 (2) 作用： 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 ―――――― → C 1 酶和 C x 酶 葡萄糖苷酶 ――――― → 复合酶 C 1 酶 C x 酶 葡萄糖苷酶 (3) 实验验证： 试 管 滤纸条 缓冲液 pH ＝ 4.8 纤维素酶 (70 ～ 80 U/mL) 条件 结果 1 1 cm × 6 cm 10 mL _____ 将 两 支 试管 固 定 在 50 mL 的 锥 形 瓶 中 ， 在 摇 床 上 以 140 r/min 的转速 振荡反应 1 h ___ ______ 2 1 cm × 6 cm __ mL ____ ______ 1 mL 11 完 全分解 基本 无变化 3 ． 纤维素分解菌的筛选 (1) 方法： 染色法，常用的有两种，一种是先 ，再加入 进行颜色反应，另一种是在 时就加入 。 (2) 原理： → 复合物 ―――→ 纤维素酶 ? ? ? ? ? ? ? 培养基中会出现 为中心的透明圈， 据此筛选 ? ? ? ? ? 刚果红 纤维素 刚果红 培养微生物 倒平板 刚果红 刚果红 红色 以纤维素分解菌 [ 跟随名师 · 解疑难 ] 纤维素分解菌的筛选 (1) 筛选原理： 刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，但 并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖反应。当纤维素被纤 维素酶分解后，该复合物无法形成，培养基中会出现以 纤维素分解菌为中心的透明圈。 (2) 筛选方法： 方法一 方法二 操 作 先培养微生物， 再加入刚果红 倒平板时加入刚果红 优 点 显示出的颜色反 应基本上是纤维 素分解菌的作用 操作简便，不存在菌落混杂的问 题 缺 点 操作繁琐，加入 刚果红溶液会使 菌落之间发生混 杂 ①由于在纤维素粉、琼脂和土豆 汁中都含有淀粉类物质，可以使 能够产生淀粉酶的微生物出现透 明圈较为模糊的假阳性反应 ②有些微生物具有降解色素的能 力，长时间培养会降解刚果红而 形成明显的透明圈 [ 自读教材 · 夯基础 ] 1 ． 实验设计流程 实验设计和课题延伸 2 ． 课题延伸 —— 纤维素分解菌的鉴定 (1) 为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要 进行发酵产 的实验，纤维素酶的发酵方法有 和 两种。 (2) 纤维素酶的测定方法， 一般是采用对纤维素酶分解滤 纸等纤维素后所产生的 进行 测定。 纤维素酶 液体 发酵 固体发酵 葡萄糖 定量 1 ．阅读教材 P29 旁栏中的纤维素分解菌选择培养基 的 成分回答下列问题。 (1) 旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什 么？ (2) 这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果有， 是 如何进行选择的？ 提示： 是液体培养基，因为配方中无凝固剂。 提示： 有选择作用。本配方中的唯一碳源是纤维素粉， 所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖，而不能分解纤 维素的微生物被抑制。 (3) 你能否设计一个对照实验，说明选择培养的作用？ 2 ．在实验过程中，为什么要进行梯度稀释？ 3 ．