绿脓杆菌检验技术讲解.pptVIP

化妆品中铜绿假单胞菌 （ Pseudomonas aeruginosa ） 的检测 ? 目的： 1. 了解化妆品中铜绿假单胞菌检测的基本过程。 2. 掌握几种培养基的配置方法。 3. 掌握铜绿假单胞菌的鉴定及生化特征。 ? 原理： 铜绿假单胞菌为需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性杆菌， 有鞭毛，在普通培养基上生长良好，菌落大小不一， 平均直径 2mm ～ 3mm ，扁平，边缘不整齐，且常 呈相互融合状态。氧化酶阳性，能产生绿脓菌素， 此外还能液化明胶，还原硝酸盐产生氮气，在 42 ℃ 条件下可以生长，可与类似菌区别。 操作步骤 检样前化妆品的处理 接样于营养肉汤增菌， 37 ℃， 12h ， 140rpm 培养 分离培养，挑取培养物接于十 六烷基三甲基溴化铵平 板， 37 ℃， 18-24h 染色镜检 配十六烷基三甲基溴化铵培 养基（ 选择性培养基，大肠杆菌 不能生长，革兰氏阳性菌生长完 全受到抑制） 配绿脓菌素测定用培养基， 明胶培养基，硝酸盐蛋白胨 水培养基，普通琼脂斜面培 养基 操作步骤 特征性检验 氧化酶 绿脓菌素 硝酸盐还原 明胶液化 42 ℃生长 试验 试验 产气试验 试验 试验 取菌 + 1 滴 接菌， 37 ℃ 接菌 接菌 接菌 二甲基对 24h + 氯仿 37 ℃ 24h 37 ℃ 24h 42 ℃ 24h 苯二胺 移出 + 盐酸 紫红色（ + ） 紫红色（ + ） 有气体（ + ） 溶解成液状（ + ） 生长（ + ） 不变色（ - ） 不变色（ - ） 无气体（ - ） 未溶解（ - ） 不生长（ - ） 实验一 培养基的制备及细菌的 分离培养 实验目的 掌握培养基制备的原理和方法 掌握细菌的分离培养 了解灭菌方法 实验原理 不同的微生物生长繁殖都需要提供一定的营养条件， 在实验室中，微生物的营养是由培养基来提供的。培养基是 按照微生物生长繁殖所需要的营养物质，用人工方法配制而 成的营养基质。 除营养条件以外，微生物必须在最适酸碱度范围内才表 现出最大生命力，因此，应针对不同的微生物将培养基的 pH 值调节到适当范围。 操作步骤 按培养基 配方称量 加水加 热熔化 调节 pH 值 分装 包装 灭菌 备用 → 操作步骤 1. 绿脓菌素测定用培养基 300ml 加热溶解 调 pH 分装试管 高压 制成斜面 2. 明胶培养基 300ml 加热溶解 调 pH 分装试管 高压 直立制成高层 3. 硝酸盐蛋白胨水培养基 300ml 加热溶解 调 pH 分装有小倒管的试管 高压 直立 制成高层 4. 普通琼脂斜面培养基 300ml 加热溶解 调 pH 分装试管 高压 制成斜面 注意事项 1. 培养基溶解时，加有琼脂的培养基易 沸，应注意看守。 2. 注意调节培养基的 pH 。 3. 称牛肉膏用玻片，称甘油用小烧杯。 4. 加热后应补足液量。 5. 注意做好标记。 细菌的分离培养 ? 原理： 通过划线，将混杂的细菌在平板表面逐一分散，经培养 后，各