8DNAFeulgen染色 文档资料.pptVIP

DNA 的 Feulgen 染色法 1. 了解 Feulgen 染色反应原理； 2. 掌握 Feulgen 染色的方法，观察染 色结果。 实验目的 DNA 经弱酸（ lmol ／ L HCI ）水解 , 其上的 嘌呤碱和脱氧核糖之间的配糖键打开 , 使脱氧 核糖的一端形成游离的醛基 , 这些醛基在原位 与 Schiff 试剂 ( 无色品红亚硫酸溶液 ) 反应 , 形 成紫红色的化合物 , 使细胞内含 DNA 的部位呈紫 红色阳性反应 . 实验原理 碱性品红为红色，结构如图 1 中 A ， A 与 能产生 SO 2 的试剂作用后（如偏重亚硫酸钾 与盐酸作用，还原出 SO 2 ），双链打开，成 为无色的 Schiff 试剂， Schiff 试剂的结构如图 中 B 所示， B 分子再与 2 个醛基（ DNA 水解后 释放出的醛基）结合又出现双链，成为结构 如图中 C 所示的化合物，呈紫红色。 图 1 Feulgen 反应的染色原理 DNA 染色后，除形成紫红色 C 化合物 外，必然有多余的 A 和 B 分子， B 分子很容 易被氧化转变为 A 有色分子，从而造成伪差。 因此必须迅速地多次用现配的 SO 2 水清洗， 使 A 分子转变为无色的 B 分子，消除染色的 伪差。 本次实验对照组的设立：