生猪重要疫病样品采集要求与实验检测意义.pptVIP

生猪重要疫病样品采集要求 与实验室检测意义 李峰 研究员 山东省滨州畜牧兽医研究院 山东省生猪创新团队滨州综合试验站 生猪重要疫病实验室检测技术研修班 分享内容 ? 实验室检测的重要意义 ? 实验室检测的主要内容 ? 生猪主要疫病样品采集要求与注意事项 ? 其他样品采集要求 实验室检测的重要意义 ? 明确所发生的疾病种类： ? 传染性因素：细菌、病毒、支原体、其它微 生物； ? 非传染性因素 ? 单纯感染 / 混合感染 ? 是否为人兽共患病 ? 病原分子生物学检测分析 ? 区域优势毒株基因型分析 ? 病原分子进化与演变 ? 病原分子序列与疫苗比对 ? 细菌培养与药物敏感性试验 ? 细菌初步鉴定：毒力、血清型 ? 药物敏感性试验：解决合理用药问题 ? 自家疫苗试制：技术储备 细菌的染色 ↓ 形态学观察 ↓ 培养基的制备 ↓ 细菌分离培养 ↓ 纯化 ↓ 细菌的生化试验 ↓ 药物敏感试验 病猪的剖检 病猪病料的采集、保存 总 RNA 的提取 ↓ 反转录 ↓ 聚合酶链式反应 （ PCR ） ? 猪瘟病毒抗体 ? 猪伪狂犬病病毒 gPI 抗体 ( 野毒 ) ? 猪流感血凝抑制试 验 ? 猪细小病毒病乳胶 凝集试验（ LAT ） ? 猪繁殖与呼吸综合 征病毒抗体 ↓ DNA 提取 ↓ PCR 血清学检测 分子诊断 细菌分离 ↓ 结果分析 生猪主要疫病样品采集要求 采样原则 1 、适时采集 ：尽可能采集到新鲜样品。用于分离病原体 的，须在病初发热期或出现典型临诊症状时采集；若制备血 清，空腹时采血。尸体上采样，应在动物死后立即采集。 2 、典型采样 ：样品具有代表性。选择典型动物，即未经 药物治疗、病状典型的动物；选择典型材料，病原体含量最 高的材料；尸体采样，采集有病变组织、器官或病变最明显 、最典型的部位。 3 、合理采样 ：群体发病时，至少采 5 头动物的病料。每一 种样品应有足够的数量。 4 、无菌采样 ：无菌操作，尤其是供微生物学检查和血清 学检查的样品 5 、安全采样 ：注意人员安全，防止感染，防止病原扩散 造成环境污染。 病理剖检 腹部朝上平放 切开四肢 颈部淋巴结 股内则淋巴结 剖检颌、颈部 皮下组织、颌下淋巴结观察 横切胸骨柄，暴露胸腹腔 观察胸腹腔器官变化 纵切胸骨柄 取出胸腔器官 剖开颅腔 暴露脑部 器 官 症状 / 病变 疑似疾病 体 表 耳尖、屁股、腹部发紫 微循环障碍：猪瘟、弓形体 背部发紫，规则菱形，边缘 整体 猪丹毒 全身通红 链球菌 鼻子流血和 / 泡沫 胸膜肺炎 背部点状出血、毛孔出血、 皮肤发白 附红细胞体、蓝耳病 会阴、臀部、四肢出现周边 紫色，中间白色圆形、边缘 紫褐色纽扣状坏死 圆环病毒 依据剖检病变推导可能发生疫病 淋 巴 结 颌下淋巴结肿大，出血性坏死 全身淋巴结有大理石样出血变化 腹股沟浅淋巴结水肿、切口外翻， 表面苍白，渗出透明液体 咽、颈及肠系膜淋巴结黄白色干酪 样坏死灶 淋巴结充血、水肿、小点状出血 支气管淋巴结、肠系膜淋巴结髓样 肿胀 猪炭疽、链球菌病 猪瘟、蓝耳、猪肺疫 圆环病毒 2 型 猪结核 急性猪肺疫、猪丹毒、链 球菌病 猪气喘病、猪肺疫、传染 性胸膜肺炎、副伤寒 血 液 血液黑或发紫，不凝固 中毒，内源性毒素：弓形 体、胸膜肺炎、链球菌、 猪丹毒 血液不凝固、稀薄 贫血，蓝耳、附红细胞体 呼 吸 道 喉头出血 猪瘟 扁桃体化脓、出血 猪瘟、伪狂犬 喉头有泡沫 蓝耳、副猪、传胸 气管有很多粘液 细菌性疾病 肺 出血斑点 纤维素性肺炎 心叶、尖叶、中间叶肝样变 水肿，小点状坏死 粟粒性、干酪样结节 表面零星、边界清楚、湿润肉样变 猪瘟 猪肺疫、传染性胸膜肺炎 气喘病 弓形体病 结核病 流感 心 脏 心包积液 心包炎、心外膜炎（绒毛心） 心外膜斑点状出血 心肌条纹状坏死带 心内膜出血 心瓣膜呈菜花样 心肌内有米粒大灰白色包囊泡 副猪、传胸 副猪、传胸、气喘病 猪瘟、猪肺疫、链球菌病 口