发酵染菌检查及分析.pptVIP

发酵工程 染菌的检查及原因分析 染菌的检查和判断 发酵过程是否染菌应以无菌试验的结果为依据进行判断。 4在发酵过程中,如何及早发现杂菌的污染并及时采取措施 加以处理,是避免染菌造成严重经济损失的重要手段。因 此,生产上要求能准确、迅速的检查出杂菌的污染。 目前常用于检查是否染菌的无菌试验方法主要有显微镜检 査法、肉汤培养法、平板(双碟)培养法、发酵过程的异 常观察法(如溶氧量)等。 1、镜检法 用革兰氏染色法( Grams stain)对样品进行涂片、染色, 然后在显微镜下观察微生物的形态特征,根据生产菌与杂 菌的特征进行区别、判断是否染菌。 如发现有与生产菌形态特征不一样的其它微生物的存在, 就可判断为发生了染菌。 此法检查杂菌最简单、最直接、最常用。必要时还可进行 芽胞染色或鞭毛染色。 2、肉汤培养法 ■通常用葡萄糖酚红肉汤作为培养基,将待测样品直接接入 经完全灭菌后的肉汤培养基中,分别于37℃、27℃进行培 养,随时观察微生物的生长情况,并取样进行镜检,判断 是否有杂菌 ■肉汤培养法常用于检查培养基和无菌空气是否带菌,同时 此法也可用于噬菌体的检査。 葡萄糖酚红肉汤 0.3%牛肉膏、0.5%葡萄糖、0.5%NaCl、 0.8%蛋白胨、0.4%酚红溶液,pH72 3、平板划线培养或斜面培养检查法 ■将待测样品在无菌平板上划线,分别于37℃、27℃进行培 养,一般24h后即可进行镜检观察,检查是否有杂菌。有 时为了提高平板培养法的灵敏度,也可将需要检查的样品 先置于37℃培养6h,使杂菌迅速增殖后再划线培养。