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适用范围
本测定规程规定了测定水中五日生化需氧量(B0D5 )的稀释与接种的方法。
测试原理
在规定的条件下, 微生物分解水中的某些可氧化的物质, 特别是分解有机物 的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶 中,在(20 ± )°C的暗处培养5d ±4 h或(2+5 ) d ±4 h[先在0~4 C的暗处培 养2 d,接着在(20 ± )C的暗处培养5 d,即培养(2+5 ) d],分别测定培养 前后水样中溶解氧的质量浓度, 由培养前后溶解氧的质量浓度之差, 计算每升样 品消耗的溶解氧量,以 B0D 5的形式表示。
仪器设备
生化培养箱: 20±1 C。
溶解氧仪: 0~20 mg/L 。
曝气装置。
溶解氧瓶: 300 mL 。
3.5滤膜:孔径为1.6 pm。
一般实验室常用仪器和设备,玻璃容器需符合国家 A 级标准。
试剂
除非另有说明,分析时均用符合国家标准的分析纯试剂。
一级水,文中所说的水均指一级水。
接种液:可购买接种微生物用的接种物质,接种液的配制和使用按说明书的 要求操作。也可按以下方法获得接种液。
未受工业废水污染的生活污水:化学需氧量不大于 300 mg/L ,总有机碳 不大于 100 mg/L
含有城镇污水的河水或湖水。
污水处理厂的出水。
分析含有难降解物质的工业废水时, 在其排污口下游适当处取水样作为废 水的驯化接种液。 也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气, 每天加入少 量该种废水, 同时加入少量生活污水, 使适当该种废水的微生物大量繁殖。 当水 中出现大量的絮状物时,表明微生物已繁殖,可用作接种液。一般驯化过程需 3~8 d 。
盐溶液
磷酸盐缓冲溶液:将 8.5 g 磷酸二氢钾、 21.8 g 磷酸氢二钾、 33.4 g 七水 合磷酸氢二钠和1.7 g氯化铵溶于水,稀释至1000 mL,此溶液在0~4 C可稳 定保存 6 个月。此溶液的 pH 值为 7.2。
4.3.2硫酸镁溶液,p ( MgSO 4)=11.0 g/L :将22.5 g七水合硫酸镁溶于水,
稀释至1000 mL ,此溶液在0~4 C可稳定保存6个月,若发现任何沉淀或微生 物生长应弃去。
4.3.3氯化钙溶液,p (CaCb) =27.6 g/L :将27.6 g无水氯化钙(CaCb)溶
于水中,稀释至1000 mL,此溶液在0~4 C可稳定保存6个月,若发现任何沉 淀或微生物生长应弃去。
4.3.4氯化铁溶液,(FeCb) =0.15 g/L :将0.25 g六水合氯化铁(FeCb H2O)
溶于水中,稀释至1000 mL ,此溶液在0~4 C可稳定保存6个月,若发现任何 沉淀或微生物生长应弃去。
接种稀释水:在 20 L 的玻璃瓶或者纯水桶中加入一定量的一级水 [加水量根
据样品的个数确定:加水量 V为.3* (4+3n ) L,每批两个空白,两个质控样,n 表示样品个数]。用曝气装置至少曝气1 h,使稀释水中的溶解氧达到 8 mg/L 以上。使用前每升水中加入上述四种盐溶液各 1.0 mL、接种液10 mL,混匀,
20 C保存。在曝气的过程中防止污染,特别是防止带入有机物、金属、氧化物 或还原物。
接种稀释水中氧的质量浓度不能过饱和, 使用前需开口放置1 h,且应在24 h 内使用。剩余的接种稀释水应弃去。
4.5盐酸溶液,p (HCI) =0.5 mol/L :将40 mL浓盐酸溶于水中,稀释至1000 mL 。
氢氧化钠溶液, p(NaOH ) =0.5 mol/L :将 20 g 氢氧化钠溶于水中,稀 释至 1000 mL 。
亚硫酸钠溶液, p(Na2SO3) =0.025 mol/L :将 1.575 g 亚硫酸钠溶于水 中,稀释至 1000 mL 。此溶液不稳定,需现用现配。
葡萄糖 -谷氨 酸标准溶液 :将 葡萄糖 (C6H12O6, 优级纯 )和谷氨酸
(HOOC-CH 2-CH2-CHNH 2-COOH,优级纯)在 130 C 干燥 1 h,各称取 150 mg 溶于水中,在 1000 mL 容量瓶中稀释至标线(也可以称 15 mg 至 100 mL )。 此溶液的BOD5为(210 i20) mg/L,现用现配。
样品前处理
若对样品结果精度要求较高时,需要进行以下前处理步骤。
pH 值调节
若样品或稀释后样品 pH 值不在 6~8 范围内,应用盐酸溶液( 4.5)或氢氧 化钠( 4.6)溶液调节其 pH 值至 6~8 。
余氯和结合氯的去除
若样品中含有少量余氯,一般在采样后放置 1~2 h ,游离氯即可消失。对短 时间不能消失的余氯,可加入适量亚硫酸钠溶液去除样品中存在的余氯和结合 氯。
样品均质化
含有大量颗粒物、需要较大稀释倍数的样品或
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