核酸提取精美生物医学6说课讲解.pptVIP

核酸提取操作与含量测定;找答案……;　　　核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作 。 ;2、核酸的纯度要求 ;（三）核酸分离纯化的注意事项 ;;④ 减少物理因素对核酸的降解，物理降解因素主要是机械剪切力，其次是高温。 ;;破碎细胞→提取核蛋白→去除蛋白质、多糖、脂类等生物大分子→去除盐类、有机溶剂等杂质→纯化干燥;DNA提取的几种方法;DNA提取的几种方法;基因组DNA－ CTAB法;　;　CTAB提取缓冲液的改进配方;　CTAB法流程图; SDS法原理; SDS法流程图 （以动物组织为例） ;基因组DNA－其它方法;基因组DNA－其它方法;基因组DNA－其它方法;细胞器DNA－差速离心法;DNA提取的基本步骤;材料准备;细胞裂解;核酸分离、纯化;核酸分离、纯化;多糖的去除： 高盐法：用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入1/2体积的5M NaCl，高盐可溶解多糖。 用多糖水解酶将多糖降解。 在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖 。 用PEG8000代替乙醇沉淀DNA：在500μL DNA液中加入200μl 20% PEG8000 (含1.2 M NaCl) ，冰浴20min。;多酚的去除： 在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：β-巯基乙醇、抗坏血酸、半