动物肝脏DNA提取与鉴定实验技术.ppt

动物肝脏DNA的制备 和鉴定 甘肃中医药大学  核酸的分粪 DNA(脱氧核糖核酸 主要存在于细胞核的染色体中 核外也有少量DNA,如线粒体DNA( mtDNA),叶绿 体DNA( CpDNA),质粒DNA ●RNA(核糖核酸 存在于细胞质中,如mRNA,rRNA,tRNA等。 述DNA,RNA外,还有非细胞形式存在的病毒和噬 菌体,其或只含DNA,或只含有RNA。  核酸的理化性质 ·在细胞内通常与蛋白质结合,以复合物形式存在 微嵱于水,不愴于乙醇,氯仿等有机滤剂 在酸性嵱漩中容易降解,在中性或弱碱性嵱液中较稳定 ·DNA)液粘度很大,RNA的粘度较小 ·在强大离心力的作用下,可以从馆漩中沉降下来  基因组DNA的提取方法 浓盐法:利用RNA和DNA在不同盐浓度溶液中的溶解 度不同将二者分离 利用SDs、cTAB(十六烷基三甲基溴 化铵)等去污剂使蛋白质变性,直接从生物材料中提取 DNA 苯酚既是蛋白变性剂,又能抑制 DNase 的降解。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA连接键 已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相 溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相  核酸制备中常用的去垢剂 核酸本身帶负电荷,结合帶正电荷的蛋台质。用于核 駛提取的去垢剂,一般都是阴寓子去垢剂 去垢剂的作用 嵱解膜蛋白及脂肪,使细胞膜破裂; 2、嵱解核糖体上面的蛋台质,使其解聚,将核酸释微出 来 3、对 RNase、 DNase有一定的抑制作用。 如:SDS、脱氧胆酸钠、4基水杨酸钠、纂-1.5-二磺 酸钠、三异丙基蓁磺酸钠