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5、培养基 ? 培养基以新鲜配制为佳，低温(4℃储存不宜超过 1周。 ? EGF对于促进IEC贴壁十分重要，它与胰岛素合用 可促进IEC生长繁殖。 ? 生长基中加入表皮生长因子、胰岛素和谷氨酰胺 等更利于原代培养的上皮细胞生长。 6、酸碱度 ? 最适pH因细胞不同及动物种属不同而异。 ? 最适pH有利于细胞本身的酶及其他生长因子发挥 较好的效果，从而影响体外培养细胞的生存。 ? IEC培养最适pH值为7．2～7．4。
IEC的鉴定 用消化酶分离培养的细胞仅凭光学显微镜形态学 观察不能鉴定为IEC，尚需其他较为特意的鉴定方 法。 1、碱性磷酸酶染色法 影响因素多，阳性率低。 2、电镜法 用电子显微镜扫面观察细胞桥粒和刷状缘是鉴定 上皮细胞很有效的方法，但价格昂贵。 3、免疫荧光法 采用特异的抗人上皮细胞膜抗原或角蛋白，特异 性强。消化酶从小肠黏膜分离下来的细胞类型主 要有IEC、成纤维细胞和平滑肌细胞，成纤维细胞 和平滑肌细胞上皮细胞膜抗原或角蛋白呈阴性， 故免疫荧光染色检测阳性的细胞可确定为IEC。
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