真菌感染与实验室诊断进展 李若瑜课件.pptVIP

系统性真菌病主要的致病真菌 ? 荚膜组织胞浆菌 ? 粗球孢子菌 ? 皮炎芽生菌 ? 巴西副球孢子菌 系统性真菌病 — 危及生命 临床常见的条件性真菌感染 临床常见的条件性真菌感染 ? 念珠菌病 : 最常见，血源感染的第 4 位。 ? 曲霉菌病 : 常见于干细胞移植、实体器官移 植、大剂量化疗患者。 ? 隐球菌病 : 艾滋病人患病率为 10-20% 。 ? 接合菌病（毛霉病） : 多见于重症糖尿病、 烧伤病及器官移植病人。 临床有增多趋势的条件性真菌 ? 非白念念珠菌感染 ? 毛孢子菌感染 ? 地霉感染 ? 镰刀菌感染 ? 枝顶孢霉感染 ? 暗色真菌感染 ? 马尔尼菲青霉 真菌感染的诊断方法 真菌感染的诊断方法 ? 真菌镜检 ? 真菌培养 ? 组织病理 ? 生理生化 ? 血清学方法 ? 分子生物学 真菌感染的实验诊断方法及问题 ? 显微镜检查 - 阳性率？ ? 培养 - 时间？敏感性？意义？ ? 血清学 - 敏感性？特异性？ ? 分子生物学 - 标准化？ 阿申蓝染色 HE PAS 组织学特点 Immunochemistry 皮肤隐球菌病的组织病理学 菌丝 孢子 曲霉病的 组织病理学 ? Prof. Richardd Calderones lecture -2006, Beijing 念珠菌病 - 直接镜检 隐球菌病 — 直接镜检 曲霉病 —— 曲霉头 曲霉病 双分支菌丝 曲霉病 —— 直接镜检 双分支菌丝 曲霉头 接合菌（毛霉）病 — 直接镜检 粗大无分隔菌丝 各种培养法 — 念珠菌显色培养基 CHROMagar Candida 生理学试验 — 碳源同化 API 20 C AUX 试剂盒 ID32C 酵母鉴定系统 霉菌的鉴定 —— 两种简易的可代替小培养的制片方法 孢子发生（ conidiogenesis ） B irth: locus W all: holoblastic enteroblastic O rder: synchronous sym podial phialidic annellidic blastic thallic conversion holothallic holoarthric enteroarthric Arrangem ent: Liberation: schizo rhexo schizo schizo just one catenate clum p cat clum p cat basip etal acrop etal schizo rhexo schizo rhexo 真菌感染的非培养诊断 真菌感染的诊断存在问题 ? 直接镜检 - 阳性率？ ? 培养检查 - 时间？敏感性？ 意义？ ? 血清学 - 敏感性？特异性？ ? 分子生物学 - 标准化？ PCR PCR, galactomannan 1-3-?-D-glucan, PCR 种特异性 属特异性 真菌通用 真菌感染的非培养诊断方法 真菌细胞壁可供诊断检测的标记 Mannan 1-3-beta-D- glucan 非培养诊断检测方法 ? G 试验检测 b- 1,3 – D- 葡聚糖 ? ELISA 法检测曲霉抗原 ? 乳胶凝集试验检测新生隐球菌抗原 ? ELISA 法检测念珠菌抗原 ? PCR_ 真菌通用引物、种属特异性引物 方法： G 试验 ? β - 葡聚糖可特异性激活鲎（ Limulus ）变 形细胞裂解物中的 G 因子，引起裂解物 凝固，故称 G 试验。 - b- 1,3-D- 葡聚糖通过激活 G 因子（ Factor G ） 引起凝集； – 内毒素通过激活 C 因子（ Factor C ）引起凝 集； ? 试剂盒 : 祛除 Factor C ? 葡聚糖特异 β -1,3-D- 葡聚糖检测方法 ? 两种试剂盒 – Fungitec-G (marketed in Japan) ? Obayashi, Lancet 345:17- 20, 95 ? “确诊真菌感染的患者” : 90% sensitive – Glucatel