肿瘤细胞能量代谢特征.pdfVIP

肿瘤细胞能量代谢特征 线粒体呼吸链酶也称为线粒体呼吸链复合物、线粒体呼吸链 复合酶。位于线粒体内膜上，由 5 个复合物组成，分别为：NADH- Q 氧化还原媒（也称为复合物 I）、琥珀酸-Q 氧化还原酶（也称为复 合物 II）、UQ-细胞色素 C 氧化还原酶（复合物III）和细胞色素 C 氧 化酶（也称为复合物 IV） ATPase(ATP 合成酶 复合物V) 。 来自纽约州立大学上州医科大学的研究人员报告称，他们发现了 一条新的介导死亡信号通路，并揭示出了抑制线粒体介导蛋白质稳态 应激及细胞死亡的一个胞质溶胶网 。这些重要的研究发现发布在 7 月 20 日的《自然》（Nature ）杂志上。 　　论文的通讯作者是华人科学家、纽约州立大学上州医科大学 生物化学与分子生物学教授陈新杰（Xin Jie Chen）博士。陈新杰教授 早年毕业于浙江大学，主要研究兴趣为线粒体生物合成与遗传、衰老 及衰老相关退行性疾病。 　　线粒体是细胞内能量合成的主要场所，对于维持细胞正常生 理起着重要作用。近年研究表明，线粒体不仅作为体内的“能量加工 厂”，而且还与氧自由基的产生、细胞死亡进程的调控有关。 　　线粒体功能异常多指由于线粒体膜受到破坏、呼吸链受到抑 制、酶活性降低、线粒体 DNA(mtDNA)损伤等引起的能量代谢障碍， 进而导致的一系列相互作用 的损伤过程。线粒体功能异常会影响整 个细胞的正常功能，从而导致病变。许多研究表明，帕金森病、阿尔茨 海默氏症、糖尿病、肿瘤等疾病及衰老均与线粒体功能 异常有关。由 于线粒体的多功能性，了解线粒体功能障碍导致特异病变的机制仍面 对着巨大的挑战。 　　以往的研究证实线粒体介导细胞死亡与能量耗尽、自由基生 成、铁硫簇生物合成缺陷、释放促凋亡和非细胞自主性信号分子以及 应激信号改变有关。在这篇 Nature 文章中研究人员报告称，在酵母中 发现了一条新的线粒体介导细胞死亡信号通路。他们将这一信号通路 命名为线粒体前体过度累积应激(mPOS)，其特征为线粒体前体在胞 质溶胶中异常累积。 　　随后研究人员证实，不只是影响核心蛋白质转运机器的突变， 破坏线粒体内膜完整性和功能的损伤也可以触发 mPOS 。他们还发现 一个胞质溶胶基因网 通 过调节核糖体生物合成、信使 RNA 脱帽、 转录物特异性转录，蛋白质陪伴及周转抑制了 mPOS 。响应 mPOS ， 几个核糖体相关蛋白包括 Gis2 和 Nog2 上调，Gis2 和 Nog2 分别促进 了帽子结构非依赖性（cap-independent）翻译及抑制了 60S 核糖体亚基 出核转运。研究人员指出，Gis2 和 Nog2 上调促进了细胞存活，这有 可能是抑制 mPOS 反馈环路的一个组成部分。 　　这些研究数据表明，线粒体功能异常可直接导致胞质溶胶蛋 白质稳态应激，由此解释了退行性疾病和衰老两个标志之间的关联。 这些研究结果对于更深入地了解脊髓小脑性共济失调、肌萎缩侧索硬 化症和强直性肌营养不良等与这一网 突变相关的疾病具有重要意 义。 1. 对血管线粒体标志性蛋白 COXIV 和 sirt3 的影响 2. 3. 对血管 DNA 氧化损伤的影响——高效液相色谱法测定 DNA 氧化损伤标志物 8-OhdG ；彗星实验方法——凝胶 电泳。 4. 对血管端粒长度和端粒酶的影响——realtime PCR 荧光， 送检。 人白细胞的端粒长度，可以反映生物年龄。建立方法，为今后 产品检测提供方法学。 （用剩下的鼠建立方法，包括全血的白细胞分离，DNA 提取， 测定端粒长度，提取线粒体） 5. 对血清中酮体、血糖、ATP 含量影响—— 乙酰乙酸、β-羟 基丁酸及丙酮、血糖 6. 对血清半乳糖苷酶的影响——衰老指标 7. 对细胞自噬的影响—— 自噬诱导剂 探讨不同细胞对糖利用的敏感性 细胞培养： HL-60 ；Jurkat ；内皮细胞、血管平滑肌细胞、L929、正 常 T 淋巴细胞。观察 48h， 药物处理：低糖培养、无