医学遗传学实验课手册.docVIP

中国协和医科大学八年制临床医学专业本科生 医学遗传学实验课手册 黄尚志 王欣 主编 中国协和医科大学基础医学院 医学遗传学系 分子细胞遗传实验教学中心 (2006年2月 美国中华医学基金会项目资助（项目编号：03-785） 编写人员名单 主编： 黄尚志 王 欣 编写人员: 张为民 高春生 姚凤霞 胡韶毅 黄尚志 王 欣 前 言 医学遗传学是遗传学和医学相结合的一门边缘学科，是现代医学中发展最迅速的学科之 一。它运用遗传学的理论和方法研究人类遗传病的发生机制、传递规律，探索遗传病的诊断、治疗及预防手段。医学遗传学又是一门依赖于实验技术的基础与临床密切结合的医学学科。因此，实验课应该是医学遗传学教学的重要组成部分。 值得一提的是，实验课的功用究竟是什么？其实，大多数教学实验在技术上是比较成熟、易于成功的。但是我们不应该因此而轻视它，我们认为，实验课不仅给学生提供一个验证理论知识、学习这一领域中有关实验技术的机会，也给他们提供了一个当科学家的机会。实验可以训练他们观察、记录、分析、判断、推理等的能力；训练他们科学地解释实验结果，清晰而富有逻辑地将结果表达出来的能力。从某种意义上说，实验课是学生正式走上科学研究或其他工作岗位前的一种培训，而不仅仅是照着实验指导完成一系列操作、最后交份报告的课程。仔细观察、随时记录等基本素质的训练应该贯穿于每一堂实验课中，使它们最终成为学生良好的工作习惯。为此，本指导大部分实验都留有实验记录的位置，以便学生能将实验结果及时的记下来。为了让学生了解如何下手做好实验记录，记什么？我们在本指导的附录部分有较详细的解释，便于学会记录。当然，完整的记录一定会收益匪浅。 在美国中华医学基金会（CMB ）项目（03-785）的支持下，从2005年开始，我校医学遗传学教学增加了实验课教学内容。为配合八年制临床医学专业本科生实验课教学，特此编写了这本实验课手册。它是在总结了我校以往医学遗传学教学的基础上，吸取其宝贵经验，并参阅有关文献资料，进一步整理编写而成的。本手册包含细胞遗传学、分子遗传学和生化遗传学三个部分实验内容，共10个单项实验。这些实验项目即有一定的联系，又具有相对的独立性，编写的每一个实验项目，都对目的要求、实验原理、实验用品和材料、方法和步骤、注意事项等方面作了充分的阐述，并备有附录，共学生参考。 本校基础医学院医学遗传学系黄尚志教授为本手册的完成倾注了心血，“分子遗传学实验”的初稿由他亲自编写；高春生老师编写了“细胞遗传学实验”相关部分的主要内容，还附上方便易记的染色体描述口诀；张为民老师承担了“生化遗传学实验”的全部内容，并花费了许多时间和精力增加了相关内容的代谢图；分子细胞遗传实验教学中心主任王欣老师编辑整理了该实验课手册的全部内容，并增编了附录等内容。 由于水平和经验所限，有不足之处在所难免，我们诚挚希望得到使用本实验课手册同学们的反馈意见，以便不断改进和更新。 医学遗传学系 张 学 分子细胞遗传实验教学中心 王 欣 2006-2-24于协和 目 录 绪论 5 第一部分 细胞遗传学实验 7 实验一、人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制备技术 7 实验二、人类染色体G 显带标本的制备及观察 14 第二部分 分子遗传学实验 18 实验三、人类基因组DNA 的提取与鉴定 18 实验四、聚合酶链式反应（PCR ） 25 实验五、核酸的凝胶电泳 32 实验五(1 琼脂糖凝胶电泳 32 实验五(2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 37 第三部分 生化遗传学实验 42 实验六、三氯化铁试验 42 实验七、尿甲苯胺蓝斑点试验 45 实验八、Folin-酚法蛋白浓度测定 49 实验九、芳基硫酸酯酶A 活性测定 52 第四部分 附录 57 附录一 如何做实验记录 57 附录二 染色体标本及Giemsa 显带制备的溶液配制 57 附录三 提取DNA 的各种溶液的配制 59 附录四 琼脂糖凝胶电泳实验试剂的配制 60 附录五 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA 实验试剂的配制 61 附录六 生化遗传学实验的溶液配制 62 绪论 医学遗传实验课的目的和任务 1. 实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生了解医学遗传学知识和理论的由来。 通过感性知识，加深对理性知识的理解。 2. 通过具体的实验操作，使学生掌握医学遗传学的基本实验方法和技能，锻炼学生的动手 能力。 3. 通过实验训练学生观察、比较、记录、分析、判断、推理和综合等科学思维能力、独立 工作能力和事实求实的科学作风。 医学遗传实验课的程序和要求 1. 预习 学生在实验课前应认真预习本手册，必须对该次实验的目的要求、实验内容、基 本原理和操作方法有一定的了解。 2. 讲解 教师对该实验内容的安排及注意事项进行讲解，让学生有充分的时间按实验课的 顺序进行独立的操作和观察。 3.